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℃冰箱贮存年,,但台氮量仅/的皮试抗原,其效期究
竟有多长, 本文作了初步观察。
结果表明,在疫区已知病人和非疫区学生中皮试显示,超期贮存~ 年的皮试抗原,
其敏感性、特异性与新制抗原无异, 表明在℃冰箱贮存之低氮量抗原只要无细菌污染
至少在年咀内,其话性不受影响。新制抗曝寝超期的假阴性为高,这是操作上的偶然误差
所致,抑或是抗原本身的质量差, 或是其它因素, 因观察倒数不多, 无法结论,有待今后观
察。
胃川寄生士病防浩砑完: 一,
酶标记抗原免疫斑点试验
, 检测间日疟抗体
芏秀珍黎世涛周肇西
四川省医哔科学院寄生虫病防治研完所
用血清学方法测定疟痕抗体,在疟疾流行病学调查及考核评价抗癌效果方面的应用日益
增多,.可以弼补血检方法不足之处在某些特殊情况下,还可以作为诊断的辅助方法。间接
荧光抗体试验是当前应用最厂的疟疾血清学检查方法但由于需用荧光显微镜, 而
且不便于同时作大量标本, 因而使之在现场应用受到一定的限制作者等在“及
建立的抗原斑点试验,的基础上,发展用一种酶
标记疟疾抗原检测疟疾抗体的简易方法即酶标记抗原斑点试验—
具有较好的效果。
材料和方法
一
、材料
.问日疟抗原的提取和标记:按文献的方法, 感染食蟹猴疟原虫
.的恒河猴切脾待疟原虫增殖至%左右虫血水平, 以裂殖体和大滋养体
期为主时放血, 用肝素抗凝, 离心去血浆, 反复洗涤血球, 分离出棕褐色感染疟原虫的细胞
层, 、离心、洗涤, 获得的疟原虫经超声处理及免疫吸收, 最后获得可溶
。用酚试剂法铡蛋白古量,参照介绍的方法制备抗原和辣根过
氧化物酶的结合物。
注: 此研究摹四川省卫生厅医学科学研究基金和四川省引进国外智力领导小组办,、室资
助。并受到卫生部原疟疾专题委会部份资助。
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.硝酸纤维素膜., 北化附厂【品。
..—稀释液;分别配制. , 取溶液

..—缓冲澈: ..即成。
.底物溶液;
,二氨基联苯胺, 天津化学试剂一厂出品: 称取加
.—溶液, 溶解临用时每中加%.。
一氯一萘酚出品, 瑞士包装取一氯一萘酚甲醇溶液/
, 用。, .稀释至, 。’
.封闭液: 按文献的方法配制。
.洗涤液: ..—内加入。。
.酶标记抗原稀释液含. 。的—缓冲液中加入小牛血清至
终浓度。
.检测血清
份健康人血清取自非流行医的献血员。
倒疟疾病人血清采自四川筠连、纳溪、峨眉等县及成都市青白江区血检查到原
虫的间日疟病人。
交叉反应血清;例粪孵阳性的血吸虫病人血清倒粪检查见华支睾吸虫卵的
病人血清例旋毛虫病人血清由云南省防疫站提供倒包虫病人血清由青海省地病所提
供。例黑热病人血清系采自本省流行区经骨穿查见利杜体的病人。
、方法;在硝酸纤维素膜上, 滴加待测血清, 置室温待千后浸入封闭液
中分钟, , 置℃温箱中孵
育分钟, 用含的冼涤液洗涤次, 每次~ 分钟, 用洗后放入新鲜
配制的应用液中, 出现明显棕色斑点