文档介绍：中国农业科学院学位论文蛋白芯片技术检测禽流感病毒抗原和抗体的研究密级:硕士研究生:赵玉辉师:王秀荣研究员申请学位类别:农学硕士业:预防兽医学向:禽流感分子生物学位:哈尔滨兽医研究所中国农业科学院研究生院论文编号:指导教专研究方培养单提交日期月.
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础\≥,,俜、毒洲砺星莒何彩礼中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会名单表论文题目蛋白芯片技术检测禽流感病毒抗原和抗体的研究论文作者赵玉辉专业研究方向培养单位芯克哈尔滨兽医研究所预防兽医指导教师王秀荣姓名职称硕单位签名评吴斌教授华中农业大学阅人孟庆文答庞海清华大学生物化学辩主席李一经东北农业大学研究究员华荣虹委会议记录厥论文答辩时间地点月庞诠跏抟窖芯克パ醣ǜ嫣硕导口博导团副研硕导囹博导口陈洪岩员硕导团高玉龙’禽流感分子生物学
刷隘辄弦关于论文使用授权的声明独创性声明时间:鼬年孑玛,≠日论文作者签名:趣王:埤研究生签名:瓮趿印日,C艿难宦畚脑诮饷芎笥ψ袷卮诵本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。时间:和,『年本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定,即:中国农业科学院有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。时间:年,月‘月
摘要禽流感葾型流感病毒珹穑筛腥径种动物的一类传染病,禽类仪荨⒁扒是其主要的易感宿主。自年首次在意大利暴发,目前禽流感已经在世界范围内分布,并且已经有人类感染禽流感的报道。鉴于禽流感对养殖业和公共卫生的危害,禽流感的检测与防制直接关系到养禽业的发展和公共卫生问题,因此研究快速、有效的检测方法一直备受关注。蛋白芯片是继基因芯片之后发展起来的一种新技术,它以蛋白代替魑<觳饽康奈铮然蛐酒咏疃奈镏什忝妫虼具有更加广阔的应用前景。暮说鞍琋具有高度保守性,在不同毒株和不同亚型之间具有交叉反应。因此以作为抗原可以检测土鞲胁《究固迳汕榭觯粤鞲屑嗖饩哂兄匾W饔谩1臼验在前人工作基础上利用禽流感蛘婧吮泶锏牡鞍祝璑柱纯化和鉴定后,点于醛基包被的载玻片上,并将胶体金技术与蛋白芯片技术相结合,采用胶体金间接标记的二抗与待检血清结合,通过柠檬酸法进行显色,对禽流感病毒抗原芯片进一步验证应用。利用制备的芯片分别检测切虯免疫血清和份现地血清,其结果与实验符合率为ァ利用制备的抗原芯片检测份野鸟免疫血清,⒖剐鲁且卟《、抗传染性法氏囊病毒血清反应结果均为阴性,表明抗原芯片具有高度特异性和准确性,可以为固寮觳馓峁┬路椒ǎ⑽V票检测其它病原抗体的蛋白芯片奠定工作基础。进一步开展了蛋白芯片技术检测乖难芯浚醪浇⒁恢钟糜诩鹎萘鞲胁《綡术、亚型抗体芯片的方法。本实验利用蔗糖梯度密度离心方法,分别纯化腍亚型病毒,免疫新西兰大白兔制备迷炊嗫寺】固澹票傅耐迷炊嗫寺】固逋ü齈缀痛炕蛍鉴定后,得到纯化的、、抗体,将其作为捕获蛋白,点于醛基包被的载玻片上,制备抗体芯片。优化一系列工作参数后,点样浓度在纸校琁%獗豢瓜∈投萳:瓜∈投任猯:。在此条件下分别对、、亚型病毒进行鉴别诊断,结果表明抗体芯片检测方法对、、尿囊液可准确鉴别,对、的鉴别诊断与病毒分离培养和检测符合率为ィ嵌訦切图觳庑Ч蝗缜傲秸摺7直对阴性尿囊液和渌切湍蚰乙杭觳庵っ骺固逍酒哂辛己玫奶匾煨浴@孟∈秃蟮难粜阅囊液探索抗体芯片敏感性表明抗体芯片可对原倍尿囊液和稀释尿囊液实现鉴别诊断,而当稀释后未能呈现荧光信号,并且抗体芯片对人工感染后的喉拭子和泄殖腔拭子样品也未能呈现阳性信号。研究结果表明,利用抗体芯片检测腍切筒《揪哂锌尚行裕ɑ有很多问题需要解决,特别是需要进一步提高其灵敏性才有可能形成完善的诊断方法。关键词:禽流感;蛋白芯片;检测
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吼韗英文缩略表英文缩写英文全称中文名称禽流感病毒核蛋白高致病性禽流感低致病性禽流感血凝/Ⅱ/.
目录第一章文献综述⋯⋯⋯⋯⋯。禽流感病