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上传人:suijiazhuang1 2018/9/16 文件大小:31 KB

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文档介绍

文档介绍:分选注意事项分选前确保液滴延迟时间准确,调节Dropdelay>98%,保证细胞分选纯度。先用无菌水清洗分选仓,洗去残留的PBS,再用酒精棉无菌消毒,尤其是wastedrawer和电极板。选择合适的喷嘴,易碎的细胞尽量选用低压和大喷嘴。进行96孔板分选时,尽量采用大喷嘴。分选前确保喷嘴没有堵塞。确保液流稳定,如果不稳定,请用无菌水冲洗,待液流稳定后再分选。酒精或clean清洗后,用无菌水大量冲洗,洗去残留的的酒精或clean,保证分选细胞活性。分选时上样前用内加适量抗生素的1×PBS进行管路冲洗,用40或70um无菌滤膜进行过滤。选择合适的进样速度,保证效率>75%,70um喷嘴流速一般不超过20000cell/s,100um喷嘴一般不超过6000cell/s(按具体情况决定)。分选时收集管里保证一定的培养液,调节时保证液滴打在液面上,防止细胞打在管壁上影响活性。15ml收集管液面高于3ml,5ml收集管液面高于1ml。收集管中培养液抗生素浓度是正常培养液的2-3倍(按具体情况决定)。如果分选过程中喷嘴堵塞,请进行超声清洗,安装完后重新调节Dropdelay。分选后分选完后请整理好无菌操作台,做好登记。分选下来的细胞请尽快换液无菌培养。如果有任何染菌或其它的情况,请及时联系我们。*独立分选时请严格按照分选操作步骤进行,如有问题请及时联系工作人员*无菌分选室里不超过3人(包括工作人员)*严禁分选室里带入食物及聊天*如果分选带有感染性病原的细胞,请及时与工作人员联系,做好防护措施*学生分选之间保持至少半小时以上的无菌清洗时间

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