文档介绍：上海第二医科大学
博士后学位论文
神经再生抑制蛋白Nogo及其受体的基因克隆和表达
姓名:包映晖
申请学位级别:博士后
专业:神经外科
指导教师:罗其中
20030801
英文缩写表弧籧】上海第二医科入学士后研究工作报告’疭“ぁ··猺猺
上海第二医科搜Р┦拷煅芯抗ぷ鞒犯乙—一·狣
中文摘要神经再生抑制性蛋白及其受体的基因克隆和表达博士后包映晖师罗其中上海第二医科大学附属仁济医院神经外科,上海,中枢神经系统,的再生与修复始终是神经科学研究的热点和难点。成年哺孚顲的微环境是阻碍神经再生的主要因素,尤其是髓鞘中的神经再生抑制分子的存在。新近克隆的分子是其中重要的神经再生抑制髓鞘因子。目前认为分子就是以前发现的一肿印R蛭K嵌加邢嗤肽氨基酸序列,。分子与易宄稍备叨韧矗腥植煌募艚犹逡籒狝,,一琋分子最大,它们都具有相同的霭被岬腃一末端。在分子的┒耍辛礁隹缒て危霭被岵谢槌傻幕纷唇峁一指簟在体外培养系统中,—肿拥乃嵝园被撕蚇隙急硐殖銮康囊种仆起生长的活性,提示该分子可能具有两个不同的抑制性功能结构域。一的轴突再生抑制作用主要通过其受体榈肌是一个具有蚅基序的个氮基酸的鞍住S隢谎琋也只在斜泶铩本研究利用高保真性从ο低常哟尤颂ツ詂目庵欣┰龅奖嗦肴说全长—籅,.蚇的基因,从成年大鼠脑文库中扩增到大鼠的基因。采用免疫荧光染色、—鸚技术研究、肿雍在成年大鼠和不同发育阶段大鼠械谋泶锖头植肌研究主要结果如下:采用高保真性从ο低常颐谴尤颂ツ詂目庵欣┰龅奖嗦肴说娜ǔ—籅,,所有的锟寺〉较嘤Φ脑靥澹庑蛘魇怠@肈重组技术构建幌盗械脑撕驼婧吮泶镌蕴濉用原核表达、纯化后的狽诤系前祝庖咧票竿枚嗫寺】固濉分析鉴定抗体特异识别人和火鼠的—钟琛L逋馀嘌墓淹唤褐氏赴上海第二医科人学萃梁笱芯抗ぷ鞅ǜ导.
关键词:、⒋笫蟆甈、、克隆、神经再生、髓鞘固逵刑匾斓难粜苑从ΑC庖咦榛陀ü馊旧崾綨狝分子在有广泛的分布和复杂的细胞、亚细胞定位。不仅存在于寡突胶质细胞中,而且在多种类型的神经元中都有高水平的表达。甊狿、分析揭示—肿雍蚇在胚胎期就有高水平的表达,而且在所有检查的发育阶段没有明显的变化。在分子表达的时间模式上,与髓鞘的发育、分化和形成关系可能并不密切。主要研究结论:以上研究结果表明,.肿釉谂咛ァ⒎⒂统赡甑腃中有广泛的的表达。胚胎的天,陀懈咚降腘瓵的分子表达,而在所有检查的时间点,没有观察到明显的表达变化。—肿釉诳J急泶锏氖奔渖嫌隝感的抑制活性笫蟮募顾鑀J汲鱿并不一致,提示—肿佑胨枨实某熟化进程关系可能并不很密切。—肿釉谏窬V斜泶锖拖赴酥写嬖贜分子这两个现象提示—肿庸δ艿母丛有浴的研究刚刚起步,还需要进一步深入研究和全面了解和肿釉神经系统发育和损伤后修复中的功能、及其受体的抑制神经再生的可能作用机制及信号传导途径、基因敲除动物的神经再生情况等,我们的研究已为此打下了坚实的基础。相信在不久的将来,研究领域的突破性进展,将为广大伤患者的神经再生和功能修复带来福音。上海第:二医科大学上后研究工作报告
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,的再生与修复始终是神经科学研究的热点和难点。鱼类和两栖类等的中枢和外周神经系统损伤后都能再生。然而在哺乳动物中,只有外周神经系统损伤后可以再生,而枢神经系统损伤的轴突却不能再生,它们的胞体发生萎缩或死亡。;神经营养因子生成不足;赴饣什皇室耍损伤产生了抑制神经元生长的因子;鹕司植拷褐氏赴纬杉嵊驳鸟:鄯涟嵬簧ご┕5ɑ逯惺嗌窬偕О艿主要原因和完整机制远未阐明。二十世纪八十年代,成年哺乳动物鹕撕蟛荒茉偕突指吹睦砺凼艿教粽健这主要基于两方面的实验事实。二十年前,等垮巴外周神经节段移植进脊髓,观察到损伤的脊髓神经纤维能够长距离地延伸。他们的发现,从根本上改变了人们对整个神经再生领域的认识,因为他们的结果清楚地显示,成年哺乳动物的脊髓神经元仍然保持着再生的能力。同时,人们也注意到,诘奈⒒肪扯允芩鹕窬拇婊和再生至关重要。缺乏足够的营养支持和存在众多的抑制因子,是构成偕境两个主要的方面。其中,抑制性因素被认为可能起着更重要的作用。耳前我们知道在枨校墒斓墓淹唤褐氏赴泶锏乃枨氏喙氐鞍譓和就可以阻止神经生长。近些年来,已经有许多抑制分子被鉴定,像蛋白多糖如、、、等,生长锥抑制因子如—等和细胞外基质分子.