文档介绍：上海第二医科大学
硕士学位论文
维甲酸调控基因RIG-K的结构和功能研究
姓名:黄秋花
申请学位级别:硕士
专业:遗传学
指导教师:陈竺

维甲酸调控基因慕峁购凸δ苎芯中文摘要一富含丝氨酸、脯氨酸的区域,而其然擞个结构域。广—旷⋯等方法试图大规模地识别维甲酸调控的基因网络/—矿一一Ⅱ一產细胞骨架的重要成员是其候选伙伴之一。除了具有交叉连经过几年的努力,我们识别了鍪蹵骺氐幕颍甪其中个为新,是癌症分化治疗的一个重要模型。『为筛选.⒁种萍跏咏达到高峰。相似的结果也存在于鼳初发病人的骨髓单个核细胞。对疓—B急泶锏挠盏疾皇艿鞍缀铣梢种萍练畔呔所抑制,为了阐明疓—,筛选人骨髓文库,得到了一些疓的候选伙伴基因,全反式维甲酸,瘟萍毙栽缬琢O赴籽2参与诱导赴只痰幕颍暌岳矗颐怯τ昧基因,狵是其中之一。未经处理前,疓在赴械膍处于较低水平,经处理∈焙驲/甂的水平明显上升,小时进一步的研究显示,狵的表达与诱导赴牧O捣只嗥叫小以核酶阻断疓—谋泶铮梢允笰盏嫉腘及细胞分化部分受阻。这些结果均提示狵可能是作用的直接靶基因。狵基因定位于湃旧澹嗦个不同的转录本,其中长型编码含霭被岵谢蛋白质,分子量为;中型编码含霭被岵谢牡鞍字剩肿恿课;短型编码含霭被岵谢牡鞍字剩肿恿课I镄畔⒀Х析显示疓—蛄杏胄∈笾幸恢中路⑾值幕騪叨韧矗’氨基端有接宋徒岷峡缒さ鞍如整合素墓δ芤酝猓咕哂邪研藕磐氛到赴羌艿墓δ堋Mü鼼—等实验证实,.產騠裙羌琒蚦、畆上海第二医科大学硕士学位论文\/
结构相关蛋白均与狵相互作用,利用荧光免疫共定位技术证实,水平则不变,,共定位于细胞浆中。舣甈半定量实验及们认为狵通过影响赴羌艿淖芭浼罢纤藕磐返传导而在诱导赴只墓讨蟹⒒又匾W饔谩5淙非械纳镅功能还有待更深人研究。关键词:全反式维甲酸;酵母双杂交系统;结果显示,旺一鞍姿奖泶锼鍾—泶镆种贫碌鳎急性早幼粒细胞性白血病;调控基因狵细胞骨架;辅肌动蛋白、,∥—、,上海第二医科大学硕宦畚
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前言我国学者年代中期首创的全反式维甲酸治疗急性早幼粒细胞自血病,,开创了肿瘤诱导分化治疗的新纪元【俊4笞诓±芯勘砻鳎珹墒乖プ笥业腁患者获得完全缓解,但大多数患者复发并产生耐药,需加用化疗才能获长期无病重要的是对于认识自血病细胞分化的分子机制奠定重要的理论基础,同时在发现控制细胞分化相关的药物靶标进而研制新型诱导分化剂等方面具有重要现实意己知是通过与其核受体的结合调控一系列基因的开放和关闭而发挥作用的贏患者,由于染色体易位,均有虻氖芾郏临床上常见的疪蜕偌腜疪俊疪疪诤匣颍涞鞍撞锞砸吧蚏哂邢孕愿旱鹘谧饔茫被认为是⒉〉墓丶蛩刂弧汀直接受调节的靶基因究竟有哪些渲校质悄男┗虻目7攀窍胞分化所必需的等等系馕抟墒亲钪詹鰽饔迷砗虯发病机制的关键,因此引起各国学者的浓厚兴趣。迄今,许多学者相继报道了一系列受调控的基因】,值得欣慰的是,本研究所自年以来,采用—咏缓图跏咏坏姆椒ㄊ酝即蠊婺5厥侗鹞姿岬骺氐幕蛲纭>年的努力,我们识别了鍪蹵骺氐幕颍渲鑫P禄騕珈研究这些基因的功能,尤其是在细胞分化中的作用是非常重要的,也是保持相应研究工作的国际领先性和首创性所必需的。狵是我们识别的个新基因之一,其表达早期即被上调。进一步的研究显示,甂的表达与诱导赴牧O捣只嗥叫校得鱎/可能是作用的重要参与者。纳镄畔⒀Х治鱿允酒湫蛄杏胄∈生存【。对诱导分化治疗机制的研究,不仅有利于指导临床正确用药、更使位于系囊桓鯮任换蚍直鹩胛挥上的颉上的基因、系腘蚝系腘基因融合,分别形成中~种新发现的基因扛叨韧础义。,上海第二医科大学硕士学位论文畆
目前我们对狵基因及其所编码的蛋白质的生物学功能还了解甚少,本讨未知蛋白的功能,是目前研究新基因功能的一种方便快捷的方法。在本项工作中,我们采用酵母双杂交的方法,对新基因泄δ芑锇榛虻纳秆。项工作的目的就是要在以前工作的基础上,进一步深入研究狵基因在维甲酸信号传导途径中的作用。研究蛋白质之间的相互作用,以己知蛋白的功能来探望通过与它相互作用的蛋白的功能背景,了解发挥其功能的可能的途径,探讨狵基因在维甲酸诱导赴只讨兴赡芷鸬淖饔谩上海第二医科大学硕士学位论文
材料和方法采用电脑拼接和扩增相结合的策略,方法参照文献。对所克隆的一、临床病例患者行裕辏换颊,男性,岁,均确诊为急性早幼粒细胞白血病初发。细胞形态学检查为汀二、┦炕菰人白血病细胞株等为我所常规维持培养细胞。上述细胞均在含%