文档介绍：影响酶促反应速度的主要因素
反应速率:
单位时间内生成物的增加量,或底物的消耗量
= 酶活力= 酶的催化效率
底物浓度
酶
酶浓度
酶活性
温度
抑制剂或激活剂等
pH
竞争性抑制
可逆(降低酶活性,但不使酶变性)
抑制剂作用机制(形成氢键) 非竞争性抑制
不可逆使酶永久性失活
(抑制剂与酶共价连接)
要求:画曲线;描述曲线特征;说出限制因素、理由和改变曲线形状的因素。
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绘制曲线图(折线图)的基本常规:■标题(以明确图的内容); 【格式:自变量与因变量之间的关系】■坐标轴:【直尺画】 ●恰当的变量名称和单位: 通常,X轴表示自变量(如处理),Y轴表示因变量。【测定的数值很大或很小时,用10的乘方表示】【★读图时,首先是了解轴的含义】 ●每条轴要有刻度和数值参照标记。【轴有时不一定从0刻度开始】【取值范围必须包含所有数据】■绘点连线(至少需要5个点;不可以随意延伸) 一幅图中有几条曲线时,要在右上角表示出图例。
酶作用曲线
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酶活性易受多种因素制约,常用坐标图来表示.
在解读坐标图题型时,要注意以下要点:
●看坐标轴含义——了解两个变量的关系
●看曲线走势——掌握变量的增减快慢特征与
意义
●看特殊点——理解特殊点的意义
(起止点、拐点、交叉点)
●看不同曲线的异同——理解曲线之间的内在
联系与区别
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反应速度的测定:
▲测定反应速度时,可以测定产物增加量或底物减少量。
▲如果底物过量,则测定底物减少量不容易精确,
而产物从无到有,便于测定,只要方法灵敏。
据图分析回答:
▲如何计算反应速度(v)?
△浓度
V= =斜率
t
▲描述反应速度变化的特征:
v只是在最初一段时间保持恒定,
随着时间延长,v逐渐下降直到0。
▲反应速度下降的原因是什么?
底物浓度的降低,产物浓度的增加,
pH或温度的变化等。
▲研究v为什么应以初速度为准?
产物
浓度
时间
反应
速度
时间
?
最
初
阶
段
最
初
阶
段
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●过氧化氢酶催化生成的氧气量可以用:
排水集气法;
或在注射器内反应,根据注射器直接读数等获得。
●构建实验装置:
方形玻璃瓶,橡皮塞,移液管,量筒,水漕,滤纸小圆片等。
绘制得出图示曲线的数据表格:
过氧化氢酶催化生成的氧气量
(每隔30s读一次)
读次
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
O2(ml)
时间
产物
浓度
反应速度的测定——以过氧化氢酶为例
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5
●在上述实验的基础上,如何研究酶浓度对反应速度的影响?
【若用滤纸小圆片浸酶液,则改变滤纸小圆片的数量,再分别测定。
别忘记:需排除滤纸对结果的干扰】
●在上述实验的基础上,如何研究温度对反应速度的影响?
不改变滤纸小圆片的数量,严格控制恒定、不同的温度,
方形玻璃瓶何时旋转也要控制好。
●上述三个实验的数据可以记录在同一个数据表格中。
不同条件下过氧化氢酶催化生成的氧气量
产
物
量
时间
20℃,4片滤纸
20℃,2片滤纸
10℃,4片滤纸
读数
每隔30s反应器中O2读数
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
实验组1
(……)
实验组2
(……)
实验组3
(……)
●结果的曲线也可以
画在同一个坐标系中。
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关于酶的常见曲线图【关注坐标轴的含义】
:降低反应活化能。
、酶浓度均不变。
时间——产物浓度;时间——反应物浓度。
每图再增加:①酶浓度增加一倍;②反应物浓度增加一倍。
——反应速度。
再增加:①酶浓度增加一倍;
②加入竞争性抑制剂;
③非竞争性抑制剂
——反应速度。
再增加:①底物浓度增加一倍;
②温度降低10℃;
③反应开始时加入一定量的不可逆抑制剂。
——酶活性。
再增加:①嗜冷微生物、嗜热微生物的酶
【加酶洗