文档介绍：高效液相色谱法测定热咳喘胶囊中黄芩苷的含量
【关键词】热咳喘胶囊;,,高效液相色谱法;,,黄芩苷
摘要:目的建立高效液相色谱法测定热咳喘胶囊中黄芩苷的含量。方法用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇∶水∶磷酸(47∶53∶)作为流动相;检测波长280 nm。%,RSD=%。结论该检测方法简便准确,可用于该制剂中黄芩苷的测定。
关键词:热咳喘胶囊; 高效液相色谱法; 黄芩苷
热咳喘胶囊为我院自制制剂品种,全方由黄芩、麻黄、天竺黄和地龙等17味中药组成,具有清热化痰、止咳平喘的作用,用于热痰所致的咳嗽、咯痰、气喘等症;以及急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作见以上症候者。原标准未建立含量测定方法,为增强制剂质量的可控性,我们参照相关文献〔1〕,用高效液相法测定黄芩中黄芩苷的含量,并对测定方法进行了方法学考察,取得了满意结果。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪:LC10ATvp泵、SPD10Avp紫外检测器、CTO10ASvp柱温箱(日本岛津);Shimadzu Libror AEL 40SM(十万分之一)天平(日本岛津);甲醇(色谱纯,天津市大茂化学试剂厂);水(重蒸馏,临用前制备);磷酸(分析纯,天津市大茂化学试剂厂);黄芩苷对照品(中检所,批号:1**********,供含量测定用);热咳喘胶囊样品(自制,批号:051101,051102,051103)。其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
色谱条件色谱柱:Diamonsil C18(5 μm,250 mm× mm,迪马);流动相∶甲醇∶水∶磷酸(47∶53∶);流速:1 ml/min;柱温:30℃;检测波长:280 nm。理论板数按黄芩苷峰计应不低于2500。
对照品及供试品溶液的制备
对照品溶液制备精密称取在60℃减压干燥4 h的黄芩苷对照品适量,加甲醇制成每毫升含45 μg的溶液,即得。
供试品溶液制备取供试品内容物约1 g,精密称定,精密加入70%乙醇100 ml,称定重量,超声处理30 min ,取出,放冷,用70%乙醇溶液补足减失重量;精密量取2 ml置10 ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用微孔滤膜( μm)滤过,取续滤液,即得。
阴性溶液制备取除黄芩以外的其他药材,按制备工艺制成缺黄芩阴性样品。取黄芩阴性样品,,即得。
系统适用性试验分别取黄芩苷对照品溶液、供试品溶液及缺黄芩的阴性对照溶液各10 μl注入液相色谱仪,记录色谱图。从色谱图可知,在此色谱条件下,样品有与对照品黄芩苷相同保留时间的对应峰,并与其他组分峰达完全分离,阴性对照无干扰。
线性关系考察精密称取黄芩苷对照品适量, mg/ml的黄芩苷对照品溶液,分别精密吸取黄芩苷对照品溶液5,10,15,25 μl,注入液相色谱仪,测定峰面积积分值,测定结果见表1,并以对照品进样量X(μg)为横坐标,峰面积值Y()为纵坐标,绘制标准曲线,回归方程为:Y=811 4X-47 ,r= 8。结果表明, 25~ 25 μg范围内线性关系良好。