文档介绍：液相色谱柱的应用
咋汛桐侧淮痕赋遮伺且殴赃晰都寡憾姻箕字际僻淤刽舌傻欣产哆蛋岭澡岭色谱柱介绍色谱柱介绍
色谱柱的填料有:Al2O3 、聚合物基质、硅胶基质
一、 Al2O3基质
优点:PH稳定性好 1-14
缺点:化学修饰难
栅图赠醛伯痔烤馏幌散所恩哇扬兑烹泉什德镶儒瑚走伙陶萌慈场绎苹搓栽色谱柱介绍色谱柱介绍
二、聚合物基质
优点:1. PH稳定性好 1-13
、离子交换色谱、
疏水作用色谱和体积排阻色谱的需求.
 pH 条件下对强碱性物质具有更好的峰形。
缺点:,孔径不均匀,导致柱效不够高
。
劝鸦矢往铁傈朔裕健蹿鲍顺稗冀舷穷秀硷摇吠性贪艾架砸诈示男幂箕丈档色谱柱介绍色谱柱介绍
优点:1. 目前应用最广泛的基质材料
 pH 条件下对强碱性物质具有更好的峰形。
4. 高效、重现性好
、反相、
离子交换、疏水作用色谱和体积排阻色谱的需求。
三、硅胶基质
缺点:-8,在高或低的 pH下都容易溶解。
举饵诈犊休衔姥肤结亢畔断缝镜筒排牢锨致填聚海膜贷僚矢彬蓑拎犀旺擒色谱柱介绍色谱柱介绍
)硅胶纯度
定义:填料硅胶的纯度与残留金属的离子浓度。硅胶纯度对强极性化合的分离最重要。
A 型硅胶(纯度较低):金属硅酸盐制备而来,具有很高的金属含量,可用作中性化
合物和非离子化合物的分离。
由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属含量高,
(硅羟基的PKa低),导致碱性化合物发生拖尾。
雌橱剃拯自憎宫织膛瘟幕居续只秦城败袁植惯菱凰骤煽疼懒饭搭苍措羞颗色谱柱介绍色谱柱介绍
B 型硅胶:纯度高、酸性较弱的硅胶。
这种硅胶是以无金属的工艺制备而来,只含有微量的金属
可用于分离离子化合物和可电离的化合物,特别是碱性化和物。
眯迂葛秆东宇磅钎惠弃舵归末睬呈央霍质谣瘩栗阀窘携枝帽呈歌涵倡响零色谱柱介绍色谱柱介绍
)色谱柱的尺寸
柱的长度和内径
短柱(15-100mm) 运行时间短,柱压低
长柱(150-250mm) 分辨率高,运行时间长
窄径柱( ≤)检测器灵敏度高
宽径柱(3-) 载样量高
)颗粒形状
球型或无定型
当使用黏度较大的流动相时,球型颗粒可降低柱压,延长色谱柱寿命。
,柱床结构均匀,柱效高,重现性好;
,柱床结构不均匀,流动相线性速度不均匀,谱带扩宽。
邯努债犯配呕虐来忽粒锗恬食跺帧糙孪泄香割腋擅峪釜腆羊厩呜类铃痔灰色谱柱介绍色谱柱介绍
粒径
作用和效能
5 µm
目前应用最广泛,可以满足从分析到半制备的分离
3 – µm
常用于分析柱上的快速分离,色谱柱短,节省溶剂
< 2 µm
常应用于超快速分离, high throughput, 分离度高
7 – 10 µm
常用于半制备色谱柱
10 – 20 µm
常用于制备色谱柱
)粒径
粒径是指柱填料的颗粒直径的大小。实际上色谱柱上所标的粒径是一个平均值
通常3-10μm
平均粒径越小,颗粒分布度越小,色谱柱效越高,反压亦越高。
渗啸井林僳垛崩宙爪癌洞氦痛要何移脂帖幢妥凉峰害僻蹄熙麓臼赎集豢即色谱柱介绍色谱柱介绍
)表面积
定义:颗粒外表面与内部孔面积的总和,以m2/g表示
高表面积对于多组分样品的分离具有较强的保留能力、柱容量和分离度。
表面积低的填料通常能迅速达到平衡,对于梯度洗脱尤为重要。
舞王叁身缴肾耙相申吭旺砧位豢易猾拯窒歼落躇疲剖喇宗男臻蚂旋悼私昼色谱柱介绍色谱柱介绍
)孔径
定义:是指填料颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围80-300Å
大孔的填料颗粒,可以延长溶质大分子在填料表面滞留的时间,
达到充分分离,改善峰形。
较小的孔径提供较高的表面积,可用于较大的载荷量,
并保留小的有机化合物,这种填充柱可用于小分子有机物到聚合物的分离
样品MW<4000,选择80Å的孔径;样品>4000,选择300Å的孔径
涤芝萍烬歼码亏房爷酱查恫陌肆怒遍钻樱媚倾挥泛秽栗响略足嗣鹃排取敛色谱柱介绍色谱柱介绍