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计
论
文
二0 年月
英文缩写弥漫性轴索损伤末端脱氧核糖核苷酸酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法矸垩疤宓磷酸盐缓冲液多聚甲醛创伤性脑损伤苏木素和伊红白一一
叫卖砗振~签名孝御雌研究生签碡咯新繇毋警警案亍毋日河匕医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺河北医科大学研究生学位论文独创性声明本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,本学位论文在导师蛑傅夹∽的指导下,由本人独立完成。料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则,本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰文责自负。.
大鼠弥漫性轴索损伤神经元、轴索继发性改变的实验观察法医临床学鉴定提供实验依据。要目的:弥漫性轴索损伤喑弥漫性白质损伤,是头部在机械性外力作用时,在剪应力的作用下引起的以白质的广泛变性为主要特征的一种脑损伤。傻ザ婪⑸部砂榉⒏髦致运鹕耍锹运鹕酥凶常见的致命性损伤。锹运鹕撕蟪鱿治扪V仔猿中迷、严重神经功能障碍和植物生存的最常见原因,致残率和致死率高,是法医学研究的重点和难点课题之一。大部分娜庋鄹谋浼湮⑿。苣淹ü篮笫斓肉眼改变进行诊断,只能通过微观的形态学验证。弥漫性脑白质尤其是在胼胝体和脑干部位的神经纤维的形态学改变是诊断闹饕2±硌б谰荨1臼笛橥ü握鹊姆椒ń⒋笫竺致灾崴魉鹕四P停⒐鄄中枢神经系统神经元胞体和轴索发生的继发性病理改变,进一步探讨弥漫性轴索损伤的病理机制,以期为法医病理学和方法:瓺笫体重:随机分为组:正常对照组、手术对照组、损伤组;损伤组包括打击后不同时相组:、、、、、、鹊姆椒ㄖ票复笫竽悦致灾崴损伤模型:称重后水合氯醛麻醉大鼠,达到一定麻醉深度后沿顶部正中线切开头皮,分离皮下组织、骨膜,暴露冠状缝和中文摘要摘、。参照
绵床连同大鼠要在打击后迅速撤离有机玻璃管下方防止二人字缝之间颅骨,将一直径为、厚牟恍飧值嫫固定于颅骨项部冠状缝和人字缝中间位置,缝合多余手术切口。次日,乙醚麻醉大鼠,将其俯卧固定于致伤装置的树脂盒内的海绵床上,保证大鼠头部位置端正,并使垫片的中央正对致伤装置有机玻璃管的下口。重锤质,又付ǖ母叽、杂上侣渲猎才绦蔚牡嫫希次打击。随后将大鼠转移至操作台上检查疼痛反射及有无颅骨骨折。正常对照组大鼠不作任何处理;手术对照组大鼠给予手术及打击前处理,但不予打击;损伤组按上述方法给予打击,根据打击后不同时间处死。大鼠麻醉后全身灌注固定取全脑,制作石蜡切片,采用染色、硫瑾染色、纫色和免疫组织化学的方法观察损伤的神经元胞体和轴索形态学改变,并用ḿ觳馍窬5腄损伤情况。数据采用均数士标准差縎表示,用统计分析软件进行统计学分析,各组均数的比较行单因素方差分析米钚∠灾罘作两两比较,以为有显著性差异。结果:鹕俗榇笫蟠蚧骱蠹纯坛鱿只杳院秃粑萃≤,,平均分数为质醵哉兆楹驼6哉兆橄啾任廾飨愿谋洌凰鹕撕笤期海马、皮层和脑干等部位神经元肿胀,体积增大,核膜不中文摘要。
清,核仁深染偏位或消失,并可见到深染的粉红色固缩神经元。酆焐ü趟跎窬J棵飨栽龆啵窬赴芪С现空隙,核固缩,胞质和胞核黏附莆0迪赴,组仍可见少量暗细胞存在。蜩H旧ń峁荷窬D崾闲√宕雍酥芸J急澜獬食状颗粒,并逐渐向外扩展,进而完全溶解消失。损伤后大脑皮层和海马开始出现阳性细胞的增多,至伤后锏礁峰,伤后韵赴愿哂谡6哉兆楹褪质醵哉兆鲜纫旧ń峁赫6哉兆楹褪质醵哉兆槟组织结构清晰,神经纤维排列整齐,表面光滑。损伤组脑组织早期无明显改变,打击后蓦仗搴湍愿刹课簧窬崴呈现扭曲、肿胀、波浪状改变和轴索收缩球形成,变化更加明显,院笫芩鹬崴魇考跎伲驶指雌诟谋洹的免疫组织化学染色结果:正常对照组和手术对照组轴索无阳性表达。损伤组于打击后可见轴索阳性表达增高,胼胝体和脑干部位出现大量呈肿胀、波浪状改变的轴索以及轴索收缩球。的表达量达到峰值,受损轴索直径增大,⑹质醵照组以及损伤后、、组仅发现个别染色阳性细胞,损伤后染色阳性细胞数目开始增多,海马凋亡细胞数在损伤后羖锔叻澹竽云げ凋亡达到高峰,损伤后大脑皮层仍有大量阳性细胞表达,与对照组相比有显著性差异中文摘要。.。
臼笛槌晒⒘舜笫驞模型,制作简便,重复性好,结果可靠,可用于幕⊙芯俊是一个渐进的过程,随着时间的推移,呈现受损轴索数目和直径的变化。鸪俜⑿缘纳窬1湫浴⑺劳觯缘蛲鑫V鳎持续时