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二0 年月
缺氧预处理对大鼠钝性心肌挫伤保护作用的研究摘要目的:探讨缺氧预处理对大鼠钝性心脏挫伤的保护作用及其机制。方法:建立大鼠钝性心脏挫伤模型,健康成年大鼠只,随机分为缺氧预处理组、单纯挫伤组孔楦和正常对照组,并将每组大鼠分为、、、个时间段。挫伤前以嘎和%5幕旌掀褰腥砣毖粗迫毖踉ご砟P汀旧ü鄄齑笫笮募∽橹Ц谋洌庖咦榛ḿ觳庑募∽橹中及鞍缀坎⒂猛枷穹治鲆嵌云浣卸糠治觥结果:免疫组织化学染色脑啻焐杉笫笮募飨酝咽В孀攀奔溲映ご伤组脱失逐渐加重,:哉兆橛猩倭縝一泶铮焐閎一泶锛跎伲给论:的表达说明其参与了心脏挫伤后心肌损伤的形成。缺氧预处理对大鼠钝性心肌挫伤有保护作用,表现为芗跚嵝募∠赴鹀耐咽Ъ按俳鴅一谋泶铩H毖预处理的心肌保护作用很可能是通过上调谋泶锢词迪值模渚咛寤朴写关键词:缺氧预处理,心脏挫伤,,,凋亡Q跽K养随时间延长挫伤组表达逐渐增多,。山西医科大学礤士学位论文
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前言心脏钝性挫伤最常见于交通事故,由于胸腔受方向盘直接撞击或突然减速引起,前者导致心脏在胸骨和脊椎之间受压,后者贝Ⅱ在突然减速时使处于相对自由运动,快速前向的心脏撞击胸骨受到相应力量的打击所致。其他原因还有高处坠落、爆炸伤、运动创伤、上腹部挤压等。尸体解剖资料表明,心脏钝性挫伤在死于胸部创伤的患者中占%。因采用的诊断方法和标准不同,其他报道的发生率为%“V囟刃脑啻焐顺3鱿盅现氐男脑并发症,如严重的心率失常、充血性心力衰竭及心源性休克。但目前,心脏挫伤的发病机制还未阐明。缺氧预处理琀侵冈は确锤炊淘萑毖酰墒棺橹细胞对后续严重的氧化应激损伤产生抵抗或耐受的一种生物学效应。姆椒ḿ虮阋行,可以广泛应用于临床和实验室研究。实验证明匀毖#俟嘧⒓叭毖酰囱跛鹕擞显著的保护作用,但缺氧预处理是否对心脏挫伤有保护作用尚未见报道。本试验应用大鼠建立钝性心脏挫伤模型,并用常规染色、免疫组织化学技术,结合计算机彩色图像分析技术观察大鼠实验性心脏挫伤及缺氧预处理后、肌钙蛋白的染色变化,探讨欠穸远坌孕脑啻焐瞬;ぷ饔貌⒔徊窖芯科渥饔没制。
实验部分饕R瞧魇约笛槎锖湍P椭票主要仪器驼婵兆远橹阉自动磨刀机一一锘苁匝橄低抗体稀释液构橼酸缓冲液单克隆抗体实验动物和分组武汉生物工程公司健康成年大鼠只,雌雄不限,体重ù笫笏婊治H毖踉ご大鼠缺氧预处理模型的制备参照等”ǖ赖姆椒ㄔ诖焐饲耙:和%幕旌掀褰腥自制生物撞击装置自制大鼠缺氧预处理装置图像分析系统切片机《锖粑实验动物和主要试剂健康成年大鼠免疫组化试剂盒单克隆抗体四笾鞘と砑煞萦邢薰天津航空机电公司江西特力麻醉呼吸设备有限公司成都泰盟科技有限公司山西医科大学实验动物中心福州迈新生物技术开发有限公司组、单纯挫伤组和正常对照组,每组又分为鍪奔涠巫椋组、组、组、椋孔只哉兆槊孔只缺氧Q跽K茄粗迫毖踉ご砟P汀大鼠闭合性心脏挫伤模型的建立预处理组和单纯挫伤组大鼠只,大鼠称重后用%的乌拉坦痥骨蛔⑸渎樽恚固定于实验台,放置肢体导连监测心电图,并将心电信号接入计算机触发系统。颈部备皮,纵行切口,分离肌肉,暴露气管,于甲状软骨下约⒁籘型切口,气管插管与小动物甃山西医科大学硕士学位论文
:上至呈。ND勘昶骄叶取,为视场平均灰度、NC婊芏取ⅰ搿N芯糠椒呼吸机相连,在心室舒张期末,使用自制生物撞击机以相同速率打击大鼠心前区造成心脏定。于损伤区和交界区取材,常规脱水,包埋。对照组大鼠只进行气管插管,不进行预处大体观察常规睢染色心脏标本经%甲醛液固定潭ㄊ奔9嫱阉瘢衅9鍴免疫组织化学染色取各组损伤区心肌组织制作蜡块标本,切成洗×巍=衅湃胧⒂需坶谒嵫位撼逡旱娜萜髦校廖⒉诩尤仁谷萜髂谝织化学试剂盒说明书法分别进行旧āR猿Ъ姨峁┒哉涨衅鲅粜远哉眨以娲谝豢固遄魑?瞻锥哉铡图像分析及统计学处理反应物进行定量分析,具体操作为:空徘衅谛脑啻焐饲芪婊∪个高倍视野糯蟊妒羒,观察窗面积,测定一定面积内阳性目标平均灰度、视场平均灰度和面积密度粜阅勘昝婊胧映∶婊谋戎,计算阳性单位,一最大灰度;倍光镜下,每张切片随机取霾饬渴右埃饬縞谛募细胞内缺失的面积,取其平均值。结果应用挫伤。分别于打击后相应时间段颈椎脱臼处死大鼠,立即取出大鼠心脏在%福尔马林固理,不打击。处死大鼠后,取出心脏,于挫伤区横向切开,观察挫伤区冠状切面染色,光镜下观察形态学改变。石蜡切片,常规脱腊至水后,体温度保持在—℃进行抗原修复,取出置室温冷却。逑矗疵庖咦各组切片均应用图像分析系统对、,数据以均数±标准差±硎尽山西医科大学硬士学