文档介绍：优
秀
毕
业
设
计
论
文
二0 年月
中山大学
硕士学位论文
RNA干扰iNOS基因对舌鳞癌细胞增殖活性及VEGF表达抑制的实验
研究
姓名:杨岚
申请学位级别:硕士
专业:口腔临床医学
指导教师:陈伟良
20060418
扇舏蚨陨嗔郯┫赴鲋郴钚约表达抑制的实验研究摘要发挥何种作用,与肿瘤组织局部浓度、肿瘤类型、以及肿瘤细胞对的敏氧化合成的。因此了解谔迥诘谋泶锸呛饬磕谠葱訬闹匾V副辍I。其中作用缓慢而持久,其产生的量较多。大量的研究表明许新生血管的形成是肿瘤的生长和侵袭转移的基础。肿瘤组织必须不断的产生专业:口腔颌面外科研究生:杨岚导师:陈伟良教授舌鳞状细胞癌琓是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤之一。手术、放疗、化疗是目前主要的治疗手段,但总的晟媛嗜只有%左右,患者的生存质量也不高。因此除现有的治疗方式外,针对造成肿瘤细胞无限增殖的特性,在基因水平进行治疗,将不失为一种非常有前途的肿瘤治疗策略。一氧化氮琋是生物体内一种小分子气体,一种结构简单的自由基,具有氧化还原性。它在体内发挥着十分重要的生理功能,参与了调节生物体的循环、神经、免疫等一系列生理、病理过程。大量的临床和实验研究表明,对肿瘤发生、发展、转移过程发挥着“双刃剑”的作用。在发挥抑瘤作用的同时,还具有促进肿瘤生长、发展、侵袭、转移的作用。而最终对肿瘤感性等多种因素有关。近期的研究发现,与一些与肿瘤细胞凋亡相关因子相互作用,抑制肿瘤细胞的凋亡,促进肿瘤细胞的增殖。更有研究发现,与肿瘤的血管形成密切相关。内源性是由一氧化氮合酶,以痪ò彼嵛5孜体内的辽儆腥掷嘈停直鹞I窬⒛谄ば⒂盏夹多肿瘤细胞中可见的表达。中山大学硕士论文二扰基因对舌鳞癌细胞增殖活性及表达抑制的实验研究
第一部分:扇舏蚨陨嗔郯┫赴鲋郴钚杂跋的实验研究新生血管,刁请制浼绦ぁV琢鲅9苌墒苎9苌纱俳蜃雍脱9苌抑制因子的共同凋控。肿瘤的血管形成则表明二者之间的平衡状态被打破。血管内皮生长因子,侵琢鲂律9苄纬勺钪要的细胞因子,通过一系列作用促进肿瘤的发展。近期的研究发现:也是促进肿瘤血管形成的细胞因子,并与相互作用,共敬俳琢鲅9艿纳伞许多研究都表明,和与肿瘤血管生成密切相关。。它是动植物生物体内普遍存在的一种现象,是生物体在进化上的种保守的基因组水平的免疫监控机制。自从年在对线虫的研究中偶然发现这一现象以来,扇偶际踝鑫R种新的分子医学研究的手段,由于其高稳定性、高效率性、高特异性、可遗传性和合成简便等特性,很快就成为众多学者进行反向遗传学研究的一种行之有效的分子生物学工具之一。在本课题的研究中,我们采用了扇偶际酰ü柿1泶镌靥宓男问剑将基冈的特异性短发夹状瑂;献H救肷鳞癌┌小A魇较赴呛蚆法分别检测赴牡蛲龊驮殖活性的变化情况;通过和猙仁笛榧觳饧际酰直鸫水平和蛋白表达水平检测和基因的表达改变情况。以进一步探讨基凶是否存在对赴蠽缘谋泶锏骺亍本研究分两个部分进行:为研究和对肿瘤细胞凋亡和增殖活性的影响,本实验用脂质体介导,将由武汉晶赛公司设计并合成的含有特异性膒质粒转染入舌鳞癌赴辏鄙枰跣远哉蘸涂白对照。流式细胞仪和ǚ直鸺觳釺赴牡蛲雎屎蜕で叩谋浠情况。免疫组化检测细胞巾的蛋白表达的改变情况。结果发现在脂质体介导的含特异性闹柿WH救肷嗔郯┫赴后,实验组赴衖鞍妆泶锵灾陀诹蕉哉兆椋憾沂笛樽橄赴中山大学邶郝畚扇舏蚨陨嗔廴鹣赴鲋郴钚约癡泶镆种频氖笛檠芯
第二部分:基因沉默抑制赴鱃泶的实验研究结论的凋亡率也明显高于其它两组;另外通过ɑ嬷粕で撸关键词:一氧化氮,诱导型一氧化氮合酶,血管内皮细胞生成因子,细胞凋亡,现实验组细胞的增殖活性则受到一定的抑制,肿瘤细胞的增殖要弱于另两对照组。前期实验已证明使基因表达下降,为了能够进一步探讨基因是否存在对肿瘤细胞的表达起调控作用,并为后期进行体内和临床实验研究提供理论依据。本实验通过灾侍褰榈迹ê基因的特异性短发夹状瑂系闹柿1泶镌体转染入赴具体方法见第一部分Mü齊篜和—等实验检测手段,分别从水平和蛋白表达水平检测赴膇表达的改变情况。结果发现通过沉默基因,实验组赴谐齣虻谋泶有显著下降外,,可以得出结论:嗔郯㏕细胞中有的高表达;甊梢越档蚷虻谋泶铮锏交虺聊男Чü齊聊琲蚩商岣逿细胞的凋亡,并降低赴的细胞增殖活性;甶蚔浯嬖谧琶芮辛O怠虺聊梢越档蚑细胞中的表达水平。细胞增殖活性,扇牛蛑瘟中山大学硕士论文扇舏蚨陨嗔埚断赴龌呋钚约癡泶镆种频氖笛檠芯
&猯甇琣.%,甅,扇舏哦陨嗔弁聪赴鲋郴钚约癡链镆种频氖笛檠芯::..瑀瓸—琯.,:眃猠”,琌痩瑂’瑃,甇簍中山大学硕二畚
.皿茫丝塞型垒王垫型苎旦型重壁塑塑:塑煎:生墨∑杷苄