文档介绍：实训十九附子理中丸中乌头碱的检查
一、实训目的
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二、检验依据
附子理中丸药品标准[《中国药典》2005年版(一部)正文部分484页]
【处方】附子(制) 100g 党参 200g 白术(炒) 150g 干姜 100g 甘草 100g
【检查】乌头碱限量取本品水蜜丸适量,研碎,取25g,或取大蜜丸适量,剪碎,取36g,加氨试液4ml,拌匀,放置2小时,加乙醚60ml,振摇1小时,放置24小时,滤过,滤液蒸干,残渣用无水乙醇溶解使成1ml,作为供试品溶液。取乌头碱对照品适量,精密称定,加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验,精密吸取供试品溶液12ul、对照品溶液5ul,分别点于同一硅胶G薄层板上,以苯-乙酸乙酯-二乙胺(14:4:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上出现的斑点应小于对照品的斑点,或不出现斑点。
三、检验原理
本品处方五味药中有附子,附子中含有多种生物碱,其中乌头碱型生物碱中C14、C8的羟基分别与乙酸、苯甲酸成双酯型(乌头碱型)生物碱存在,如乌头碱、美沙乌头碱等。这种双酯型生物碱亲酯性强,毒性大,因此附子需要经过炮制加工降低其毒性。为保证用药安全,《中国药典》采用薄层色谱法对乌头碱进行限量检查。
四、仪器与试剂
硅胶G薄层板、展开槽、微升毛细管或微量注射器、分析天平、水浴锅、震荡器、量瓶等。
乌头碱对照品(中国药品生物制品检定所)、附子理中丸、乙醚、无水乙醇、苯、乙酸乙酯、二乙胺、氨试液、稀碘化铋钾试液等。
五、实验步骤和内容
,研碎,取25g,加氨试液4ml,拌匀,
放置2小时,加乙醚60ml,振摇1小时,放置24小时,滤过,滤液蒸干,残渣用无水乙醇溶解使成1ml,作为供试品溶液。
,精密称定,加无水乙醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
、对照品溶液5ul,分别点于同一硅胶G薄层板上。
-乙酸乙酯-二乙胺(14:4:1)适量,预饱和20~30分钟,放置已点样的薄层板,展开8~15cm,取出,晾干。
,对比供试品色谱与对照品色谱相应位置上出现的斑点大小。
【操作要点】
(1)本品取样25g,要遵循“随机、均匀”的原则,应从整批药品中抽取一定数量的样本,破碎、混合均匀后,再从中称取试验所需数量的样品。
(2)供试品、乌头碱对照品的称取要用分析天平精密称定。
(3)供试品溶液制备的过程中需要蒸干滤液,必须在通风橱中水浴加热回流浓缩,回收乙醚,不能接触明火。
(4)供试品溶液与对照品溶液的制备时,要用适当容量的容量瓶定容。
(5)需使用市售薄层G板,用前需要在110℃,活化30分钟。
(6)使供试品与对照品的点样点大小一致或相近。
(7)展开时,需要预饱和20~30分钟,并在层析缸口涂凡士林以密闭,以克服边缘效应。
(8)显色剂喷洒时要均匀。
六、检验结论
根据试验记录和结果,填写检验报告,对本品检查做出结论。
七、实训思考