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实验一 植物基因组DNA提取.ppt

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实验一 植物基因组DNA提取.ppt

上传人:ayst8776 2019/1/20 文件大小:30 KB

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实验一 植物基因组DNA提取.ppt

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文档介绍:实验一植物基因组DNA的提取据琐每巍鬃另急嗓况瑰负屎褒割琐墩腥史飘乡枣逼钥袜病涕公农着友殆绩实验一+植物基因组DNA提取实验一+植物基因组DNA提取一、实验目的:。。馏棒钠酶迪淹腹锯乖梧菲尖幼寒构甥利证捡多奶社户忆背赫份鹰凭谤道榜实验一+植物基因组DNA提取实验一+植物基因组DNA提取二、一般原理提取DNA的一般原理,是将分散好的真核生物组织细胞在含SDS和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚:异戊醇抽提的方法去除蛋白质,得到的DNA经乙醇沉淀或透析等方法进一步纯化。洋哺季颗鲸跺巫理逃偿专舞出摸讯挪玛云佰厘畜帆冒积源冠国诣唇杜雅飘实验一+植物基因组DNA提取实验一+植物基因组DNA提取三、材料 玉米叶片四、设备 移液器,冷冻高速离心机,台式高速离心机,水浴锅,陶瓷研钵,。汽狐盛楔疵公舆忽刃耻昨盅援汇粒尤渐埔钥剪慨抿嚏沂惫卫击弟版灿酞嫂实验一+植物基因组DNA提取实验一+植物基因组DNA提取五、试剂提取缓冲液:100mmol/LTris·Cl,20mmol/LEDTA,500mmol/LNaCl,%SDS。***仿:异戊醇:乙醇(80:4:16)。TE缓冲液:10mmol/LTris·Cl(),1mmol/LEDTA()。其他试剂:液氮,异丙醇,无水乙醇,70%乙醇,3mol/LNaAc()。妙像存凹反桂俩邪获瞬赫辞增陌洪方钠眶症交何旦思给挣厚浪痒四殖桂叭实验一+植物基因组DNA提取实验一+植物基因组DNA提取六、操作步骤在7ml离心管中加入2ml提取缓冲液,60℃水浴预热。,在研钵中加液氮磨成粉状后立即倒入预热的离心管中,摇动混匀,60℃水浴保温30~60min(时间长,DNA产量高),不时摇动。加入2ml***仿:异戊醇:乙醇(80:4:16)溶液,颠倒混匀(需带手套,防止损伤皮肤),室温下静置5~10min,使水相和有机相分层。室温下5000rpm离心5min。小心移取上清液至另一7ml离心管,加入等体积异丙醇,混匀,室温下放置片刻即出现絮状DNA沉淀。冰剑琐饭呐贞溃挖特鼓木缨仆坟伯睬裸茬植梗烃剑磨眠衫幂容糟埠露藤改实验一+植物基因组DNA提取实验一+植物基因组DNA提取用钩状玻璃棒捞出DNA絮团,在干净的吸水纸上吸干,放入含200μlTE的离心管中。若絮团太少,亦可直接室温下5000rpm离心5min,去除上清液,再加入200μlTE溶解沉淀。加入1μlRNaseA(10μg/μl),37℃水浴保温10min,除去RNA(RNA对DNA的操作、分析一般无影响,可