文档介绍：酶联免疫吸附试验的
影响因素

检验科
实验过程中的影响因素
终止与读数
结果的判读
试剂
加样
温育
样本
洗板
显色
一、标本
排泄物
血清
唾液
尿液、粪便
分泌物
体液
血清标本
脂血标本
溶血标本
标本的保存
标本的离心
采血试管
采血试管
(血清);
肝素抗凝血浆会增加OD值;EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA检测系统中辣根过氧化物酶活性;
.
标本采集后,应先将标本37°放置
30-60分钟后采用3000r
/min离心15-20分钟,取
上清液加样。
15min 3000r/min
标本的离心
标本的离心
强行离心分离血清,会使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块或附着在酶标板孔壁内使酶标记物不易洗掉,易造成假阳(阴)性结果。
标本的保存
1. 一周---- 2~4℃保存;
2. 超过一周---- 建议-20℃保存。
3. 冰冻血清融解后,蛋白质会出现局部浓
缩而分布不均,加样前应充分混匀。
标本的保存

4. 混浊或有沉淀的血清标本应先离心或
过滤,澄清后再检测。
5. 作多次检测,宜少量分装冰存;
6. 血清标本宜在新鲜时检测尽量避免细
菌污染。
避免细菌污染
,菌体中可能含有内源性的
HRP会产生假阳性;

,其所分泌的一些酶可能会对
抗原抗体等蛋白产生分解作用(如明胶酶
等蛋白水解酶);

-半
乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定
方法产生非特异性干扰。