文档介绍：免疫技术在诱导性多能干细胞基础研究中的应用
演讲者:宋骏
时间:2012-11-15
背景
结果
讨论
背景
近年来,诱导性多能干细胞的研究十分热门,此细胞系是利用病毒转染四个全能性的因子(Oct4、Sox2、Klf4、C-Myc)来使羊水细胞进行重编程,建立了我们需要的干细胞系,在成功建立后,我们需要利用免疫技术来鉴定所建的细胞系,主要是使用免疫荧光技术和免疫组化,来完成我们的建立和鉴定工作。
预备做诱导性多能干细胞的细胞系:
人成纤维细胞(自建)
羊水细胞(医院给予)
建立来源于人皮肤的成纤维细胞,用DAPI进行核定位,染人成纤维细胞特异性的抗体Vimentin,在荧光显微镜中观察。
AKP染色,初步鉴定用羊水细胞建立的诱导性多能干细胞成克隆生长。
建立的四株诱导性多能干细胞免疫荧光染色,利用干细胞的全能性抗体进行鉴定。
诱导性多能干细胞注射免疫缺陷小鼠,取得畸胎瘤,进行石蜡切片并HE染色来鉴定三胚层( a是低倍镜的大体图 b是神经上皮 c是软骨 d是主要是平滑肌 e是肠上皮 f是肺上皮 软骨肌肉是中胚层 神经上皮是外胚层 小肠上皮和肺(呼吸)上皮是内胚层
结果