文档介绍：2006-2009年保定市儿童医院产超广谱β-内酰胺酶
表型及基因型分布的研究
王美英
(河北省保定市儿童医院检验科河北保定市 071051)
【摘要】目的了解我市临床儿科患者分离的肠杆菌科细菌中ESBLs的流行和分布情况,以及产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因型别。
方法对2006-2009年保定市儿童医院分离的750株肠杆菌科细菌用PCR技术对ESBLs进行基因分型。结果保定市儿童医院2006年-%,%,%;CTX-M型阳性383株、TEM型阳性419株、SHV型阳性272株、OXA型阳性13株,无VEB和PER基因型。结论保定市儿童医院2006年-2009年大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率较高,产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药表型以水解头孢噻肟和头孢曲松为主,为临床产ESBLs细菌引起感染的预防和治疗提供可靠的参考。
关键词细菌; ESBLs;基因型
三代头孢菌素如头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶和单环酰胺类抗菌素如氨曲南在临床上的广泛应用,导致对这类抗生素耐药的细菌不断增多,其主要机制是细菌产生了能水解氧亚氨基β-内酰胺抗生素的超广谱β-内酰胺酶(extended-epectrum b-lactamases,ESBLs)。产ESBLs菌常具多重耐药性,易导致医院内的暴发流行,且流行状况及耐药性存在地区差别,并对三代头孢菌素表现敏感而误导治疗,故被认为是革兰阴性菌中最危险的耐药形式,因此,了解我市临床儿科患者分离的肠杆菌科细菌中ESBLs的流行和分布情况,以及产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌基因型别及最佳检测底物及耐药性特点,从而防止产ESBLs株的区域性流行,指导临床治疗,以免延误病情和造成浪费。
材料与方法
2006年1月至2009年12月,保定市儿童医院患者标本中分离出的耐药性肠杆菌科细菌。 25922, 700603(产超广谱
b-内酰胺酶菌株)
革兰阴性杆菌培养基:中板(英国Oxoid公司)
药敏M-H琼脂培养基(英国Oxoid公司)
营养肉汤(英国Oxoid公司)
全自动血培养仪
法国生物梅里埃公司
VITEK 2 全自动微生物鉴定仪
法国生物梅里埃公司
PCR扩增仪
杭州博日
水平凝胶电泳槽
日本
实验方法
菌株的分离、培养、鉴定
所有标本按常规接种,VITEK2全自动微生物分析仪鉴定。
ESBLs表型筛选试验
选用头孢泊肟(CPD)、头孢他啶(CAZ)、头孢噻肟(CTX)、胺曲南(ATM)、头孢曲松(CAX)药敏纸片(均30mg/片),用Mueller-Hinton琼脂,改良Kirby-Bauer纸片扩散法测试抑菌环直径。凡头孢泊肟或头孢他啶的抑菌环直径≤22mm,或头孢曲松≤25mm,胺曲南或头孢噻肟≤27mm,均应高度怀疑为产ESBLs菌株,需进一步做确证试验来加以确证。
ESBLs表型确证试验
LS推荐的标准纸片扩散确证法测定ESBLs指南操作,用头孢他啶(CAZ,30mg/片)和头孢他啶+克拉维酸(C