文档介绍：摘要目的:恶性肿瘤是严重威胁人类生命和健康的疾病。恶性肿瘤的治疗方式以手术治疗为主,而尽早诊断并进行根治性手术是避免肿瘤转移,延长恶性肿瘤患者生存时间,提高五年生存率的关键。对高危人群进行定期筛查是实现病人早期诊断的重要策略。目前肺癌和大肠癌缺乏有效的血清学筛查方法,探索肺癌和大肠癌的有效早期筛查方法显得尤为重要。方法:伟┗颊哐G宥郧捌诖臃伟╇目庵杏τ没旌涎G迳秆〕的个噬菌体肽进行从Γ又刑粞〕鲇敕伟┭G宸从π愿叩目寺。应用例肺癌血清和例对照血清验证挑选出的噬菌体肽诊断肺癌的能力,构建肺癌早期筛查血清标志群。对其中一个噬菌体肽所比对的蛋白在组织中的表达应用组织芯片进行免疫组化分析。∪蟪Π┳橹瓯竟菇删展示肽库;结合疓的琼脂糖珠分别富集大肠癌组及非肿瘤对照组血浆中的轮亲和筛选,富集大肠癌相关肽;随机挑取稚秆『蟮个噬菌体克隆,用椒ǔ醪缴秆〕鲇氪蟪Π┗颊呋旌涎G搴投哉栈旌涎清反应性存在差异的克隆。再用例大肠癌患者血清和例对照血清复筛出能区别大肠癌血清和对照血清的克隆。最后再应用例大肠癌患者血清和例对照血清对这些筛选出的克隆早期筛查大肠癌能力进行验证。同时对相关克隆,进行插入片段的序列测定,将其序列进行和比对,通过对比对基因功能、与肿瘤关系进行文献挖掘;选择一个克隆多肽序列所比对上的蛋白,对其在大肠癌组织中的表达情况进行免疫组化分析,辅证该克隆的诊断学意义。结果:⑾个噬菌体克隆,应用这鍪删蹇寺《苑伟┙辛:霞测,采用回归分析绘制的呦旅婊可达到,┫赴懈弑泶铮谡7巫橹推渌±砝嘈偷姆伟┳橹中均不表达。ù蟪Π┦删逭故倦目獾牡味任.,经其重组率为%,库容为×,初筛共个与大肠癌患者混合血清和对照混合血清反应性存在差异的噬菌体克隆。测序后,比对的基因中中文献报道,个基因与肿瘤相关,龉δ芪粗!复筛瞿芮鸫蟪Π┭G和对照血清的大肠癌相关噬菌体肽,应用这鍪删逭故倦慕辛:霞觳馐保采用回归分析绘制的呦旅婊可达到,组内肺癌和大肠癌早期筛查自身抗体标志群的筛选
甇笃銩可达到。渲号噬菌体多肽序列所比对上的蛋白经免疫组化验证在直肠管状腺癌细胞中相对于配对癌旁组织中出现高表达,蛋白主要定位于细胞胞膜和细胞浆。结论:狙芯看臃伟┦删逭故倦目庵行纬闪艘桓隹捎糜谠缙谏覆榉伟自身抗体的血清标志群,可用于对肺癌患者进行血清学筛查。发现鞍在肺腺癌细胞中高表达,而在其他类型的肺癌组织和正常肺组织中均不表达,可能是一个肺腺癌相关的肿瘤抗原。菇艘院鹤迦宋;〉拇蟪Π┦删逭示肽库,形成了一个可用于早期筛查琢隹乖陨砜固宓难G灞曛救海现蛋白表达在直肠管状腺癌细胞中高表达,可能是一个相关的肿瘤抗原。关键词肺癌大肠癌,噬菌体展示肽库,肿瘤相关抗原,分子标志第二军医大学硕士学位论文
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缩略词表肺癌和大肠癌早期筛查自身抗体标志群的筛选
第二军医大学硕士学位论文.
肺癌和大肠癌早期筛查自身抗体标志群的筛选.
月到怂烙诙裥灾灼T谥泄郎瓴糠质邢厍笆患膊∷劳鲎恶性肿瘤是严重威胁人类健康和生命的疾病,全球每年每十万人中约有统计中恶性肿瘤居死因首位,占总死因构成的。恶性肿瘤的治疗方式以手术治疗为主,尽早诊断并进行根治性手术是避免肿瘤转移,延长恶性肿瘤患者生存时间,提高五年生存率的关键。但由于恶性肿瘤的发生缺乏特异症状,有一定的隐匿性,往往患者诊断时己处于中晚期,使得根治性手术无法开展或已发生远处转移,导致手术效果不明显。而对高危人群进行系统定期的筛查是实现病人早期诊断的重要保证。因此探索恶性肿瘤的有效早期筛查方法显得尤为重要。本研究选择肺癌和大肠癌进行相关方面的探索。肺癌是世界范围最常见的恶性肿瘤,在肺癌标化发病率和标化死亡率统计中,肺癌均居恶性肿瘤的第一位【。全球每年约有蛐抡锒衔7伟的病人为原位癌,可以接受根治性的手术网。尽管基因组学和蛋白质组学出现快速发展,目前仍缺乏有效的血清学标志用于肺癌诊断和筛查,目前临床常用的检测指标,如窬L匾煨韵┐蓟浮和等由于灵敏度和特异度受限,不能成为有效的血清学标志,实现对肺癌病人的早期筛查。大肠癌,简称屺俏P踩死嗌娴闹饕6裥约膊≈唬发病率约为万分之二左右。美国是大肠癌发病率最高的国家之一,每年大约有万人新患大肠癌,且每年有近蛉怂烙诟貌4蟪Π┰谖夜彩浅<恶性肿瘤之一,根据中国卫生部卫生信息年统计数据表明,发病率占全部恶性肿瘤的第唬蟪Π┧劳雎饰颍及┲⒅滤赖位乜K孀盼的提高,社会人口逐步走向老龄化,以及饮食结构的改变,在经济发达的地区和城市,大肠癌的发生有逐渐增加的趋势,正成为威胁我国人们身体健康的主要疾病嵋4蟪Π┎捎靡允质踔瘟莆V鞯淖酆闲灾瘟疲词质跚