文档介绍：一、实验目的1、掌握三点测交的原理及方法;2、学****三点测交的数据统计处理及分析方法;3、了解绘制遗传学图的原理和方法二、实验材料黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)品系:野生型果蝇(+++):红眼、长翅、直刚毛三隐性果蝇(wmsn3):白眼、小翅、焦刚毛三隐性个体:白眼(w)、小翅(m)、焦刚毛(sn3),这三个基因都位于X染色体上。三、实验仪器设备、药品体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿等。***、玉米粉、琼脂、红塘、酵母粉、丙酸等。位于同一条染色体上的基因是连锁的,而同源染色体上的基因之间会发生一定频率的交换,使子代中出现一定数量的重组型。重组型出现的多少反映出基因间发生交换的频率的高低。而根据基因在染色体上直线排列的原理,基因交换频率的高低与基因间的距离有一定的对应关系。基因图距就是通过基因间重组值的测定而得到的。如果基因座位相距很近,重组率与交换率的值相等,直接将重组值作为基因图距;如果基因间相距较远,两个基因间往往发生两次以上的交换,必须进行校正,来求出基因图距。四、实验原理三点测交:用野生型纯合体与三隐性个体杂交,获得三因子杂种(F1),再使F1与三隐性基因纯合体测交,通过对测交后(Ft)代表现型及其数目的分析,分别计算三个连锁基因之间的交换值,从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置,即相当于进行三次两点测验,而且能在试验中检测到所发生的双交换。四、实验原理四、实验原理如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换,那么预期的双交换频率应当等于两个单交换频率的乘积,但实际上观察到的双交换值往往低于预期值,因为每一次发生单交换,它邻近也发生一次交换的机会就减少,这叫干涉。一般用并发率表示干涉的大小。并发率=观察到的双交换频率两个单交换频率的乘积+++msn3wmsn3w×msn3wmsn3wmsn3w+++×(♂)♀(♂)♀msn3w+++msn3w+++msn3w+++msn3wm+++sn3w+++msn3wmsn3+++w++++sn3+msn3wm+w+++P:F1:(测交)四、实验原理雄蝇产生两种配子雌蝇X染色体上三对基因之间发生交换重组,产生8种雌配子因为F1代雄蝇为三隐性个体,所以F1代雌雄蝇自交时,即测交,F2(Ft)代可以得到8种表型。F2(Ft)中亲组合最多,而发生双交换的表现型个体数应最少。四、实验原理五、实验步骤1、选处女蝇:每组正、反交各1瓶,在8-12h内收集处女蝇5-6只,可提前2-3天收集。2、杂交:将处女蝇、雄蝇各5-6只,麻醉、转移到新的杂交瓶中,确保杂交瓶中各只果蝇完全苏醒,没有死蝇。贴好标签,注明杂交组合、日期、姓名,于25℃培养;3、释放亲本:7d后,处死杂交亲本(一定要干净)。4、观察F1:再过4-5天,F1成蝇出现,连续观察2—3天,或在处死亲本7天后,集中观察记录F1表型。要求每组至少统计250只果蝇。4、F1互交:选取5-10对F1果蝇,转入一新培养瓶(不需处女蝇,正交和反交F1不能混),贴好标签,于25℃培养。5、释放亲本:7d后,杀死F1代亲本果蝇。6、观察F2:再过4-5d,F2成蝇出现,开始观察眼色,翅形及刚毛形态,同时记录F2各种性状果蝇的数目,连续统计7-8d。注意:(1)要求每组至少统计250只果蝇。(2)如果做正交只需统计雄性个体。(3)统计过的果蝇放入酒精瓶中,杀死。五、实验步骤