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EASYspin Plus 植物RNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书.doc

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EASYspin Plus 植物RNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书.doc

上传人:bdjigr52 2019/2/28 文件大小:114 KB

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EASYspin Plus 植物RNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书.doc

文档介绍

文档介绍:版本号:160120EASYspinPlusPlantRNAKitEASYspinPlus植物RNA快速提取试剂盒目录号:RN38适用范围:适用于快速提取植物组织细胞总RNA,使用独有基因组DNA清除柱技术可有效清除电泳可见gDNA残留,RNA可用于反转录PCR,荧光定量PCR等。试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(RN3802)裂解液RLT室温50ml裂解液CLB室温8ml裂解液RLTPlus室温25ml去蛋白液RW1室温40ml漂洗液RW室温10ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-freeH2O室温10mlPLANTaid室温5ml基因组DNA清除柱和收集管室温50套RNase-free吸附柱RA和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。储存事项:不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。注意事项所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf5415C或者类似离心机。需要自备乙醇,研钵(可选)。样品处理量绝对不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱RA处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。裂解液RLT和RLTPlus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。关于DNA的微量残留:一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留(DNase消化也无法做到100%无残留),本公司的EASYspinPlusRNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA清除柱技术,绝大多数DNA已经被清除,不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。将RNA提取物用RNase-free的DNaseI处理。本试剂盒还可以用于DNaseI处理后的RNA清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱RA上进行DNaseI柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒(货号:RN34)前可先索取具体操作说明书。仔细阅读补充说明2,如果裂解液CLB效果好,可以联系我们单独订购裂解液CLB。以后可直接订购RN53EASYspinPlus多糖多酚复杂植物RNA快速提取试剂盒。操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)提示:第一次使用前请先在漂洗液RW瓶加入指定量无水乙醇!直接研磨法(提取简单植物样品推荐此法,但是简单样品也可以用液氮研磨法):(冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg放入研钵),加入10体积