文档介绍：:HepaticStellateCells;PrimaryHepatocellularcarcinoma;Anti-,本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知,除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名:李靓日期: 2010 年 5月25 日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本论文属于保密□,在 年解密后适用本授权书。不保密□。(请在以上方框内打“√”)学位论文作者签名: 李靓 指导教师签名:叶进日期:2010 年5 月 25 日 日期:2010 年 5 月25 日前 言对于癌症发生机制的广泛研究中,大部分学者已经认同了存在“肿瘤干细胞”的理论:即肿瘤起源于干细胞,肿瘤细胞有异质性,肿瘤组织中只含有少量可以无限克隆增生的肿瘤干细胞。不同于传统认为的所有表型不同的癌细胞均具有可以无限增生和转移的潜能,而是只有少数细胞可以无限克隆扩增并形成肿瘤,而其余大多数细胞只有有限克隆扩增的能力。这一小部分亚群细胞,表现出一定的干细胞特征,与其具有相似的信号传导通路,且对于化疗药物不敏感,被称为肿瘤干细胞。首次发现这种具有癌干细胞特性的是在对于白血病的研究中,发现白血病干细胞的表面携带CD34抗原[1],而CD34也同时存在于造血干细胞表面,但其他前体和成熟细胞均没有;另外它还表达CD38抗原,但造血干细胞普遍缺乏该抗原的表达;后又发现有些白血病干细胞的表面还携带有CD133抗原。后续在对脑肿瘤及许多实体肿瘤如脑肿瘤、前列腺癌、肺癌等的研究中已经鉴定并分离出来某些表达CD133抗原的具有肿瘤干细胞特性的细胞群[2,3,4]。于是肿瘤干细胞的表面特征性抗原之一的CD133,成为了肿瘤学研究中的一个热点。原发性肝细胞肝癌(PrimaryHepatocellularcarcinoma,HCC)是目前发病率居世界前列的肿瘤之一,在我国恶性肿瘤死亡顺序中仅位于胃、食道而居第三位,部分地区甚至上升至第二位。肝癌发生的细胞学机制仍不十分清楚,但明确了乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、酒精、药物、致癌毒素、遗传等等是引起肝癌的主要因素,常在肝纤维化、肝硬化的基础上开始发展。尽管过去几十年中对于肿瘤的治疗方法日新月异,除了手术治疗外,各种化疗、放射疗法、介入疗法以及生物疗法等方案已经成熟,且确实有短期的效果,但患者五年生存率仍然没有明显提高,且极易复发,预后不佳。肝癌大多在肝纤维化的背景下发生,肝硬化已经成为公认的癌前病变。而在肝纤维化和肝损伤再生中具有重要作用的肝星状细胞(Hepaticstellatecells,HSC)是否与肝癌相关也引起了人们的重视。目前有研究指出,HSC可能由骨髓间充质干细胞(BoneMesenchymalStemCell,BMSC)分化而来,BMSC是一种具有多能分化的原始细胞,并且具有恶性转化的潜能。因此我们推测,HSC是否表达相关特异性抗原如CD133,而表现出类似肿瘤干细胞的特性,具有恶性转化的潜能,从而导致肝癌的发生。而在肝纤维化、修复再生过程中,P75NTR被发现特异性地表达于活化HSC表面,可以与HSC旁分泌的HGF相结合来诱导HSC的凋亡,从而逆转纤维化过程[5]。所以在肝硬化进展的过程中及肝癌发生后,P75NTR的表达及作用也同样值得关注。本研究采用免疫组化、荧光、基因及蛋白水平检测来探讨HSC是否表达肿瘤干细胞特征性抗原CD133,以及在肝癌和癌旁组织中表达的差异,并且与肝癌临床特征相关的程度。同时检测P75NTR基因在癌旁、高分化肝癌及低分化肝癌中表达的差异与临床意义。试验材料一、研究材料标本来源:所有标本来自我院肝胆外科2008年5月~2008年l2月期间手术切除的肝脏肿瘤及配对癌旁组织,共30例,所有病例均经临床、实验室化验指标、影像学资料及本院病理科组织学结果证实为肝细胞性肝癌。所有患者术前未经化疗、放射等治疗。其中男性24例,女性6例;年龄范围25岁至67岁,中位年龄4