文档介绍:基因操作技术聚合酶链式反应(po;ymerasechainreaction,PCR)提纲一、PCR技术简史二、PCR的基本原理三、PCR的反应条件四、’3’TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG3’5’解旋酶解链酶DNA解旋解链合成引物子链延长一、TAGC5’3’TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG3’5’DNA解旋解链合成引物子链延长GGAUCG5‘AUCGCG5‘引物酶引物酶RNA引物RNA引物DNA的复制核酸体外扩增的设想聚合酶链反应的发明一、TAGC5’3’TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG3’5’DNA解旋解链合成引物子链延长GGAUCG5‘AUCGCG5‘TAGCGCTATCGCATCGACGCT3’ATAGCGTAGCTGCGAGGATCG3’DNA聚合酶DNA聚合酶DNA的复制核酸体外扩增的设想聚合酶链反应的发明一、PCR技术简史DNA的复制核酸体外扩增的设想聚合酶链反应的发明一、PCR技术简史1971年,Khorana提出:经过DNA变性,与合适引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因。但由于测序和引物合成的困难,Khorana的设想被人们遗忘了……1985年,美国PE-Cetus公司的Mullis等人发明了聚合酶链反应(PCR)基本原理是在试管中模拟细胞内的DNA复制最初采用E-coliDNA聚合酶进行PCR,由于该酶不耐热,使这一过程耗时,费力,且易出错耐热DNA聚合酶的应用使得PCR能高效率的进行,随后PE-Cetus公司推出了第一台PCR自动化热循环仪DNA的复制核酸体外扩增的设想聚合酶链反应的发明一、<<TheUnusualOriginofthePolymeraseChainReaction>>1989年美国《Science》杂志列PCR为十余项重大科学发明之首,比喻1989年为PCR爆炸年,Mullis荣获1993年度诺贝尔化学奖。生物样品DN***段基因诊断基因治疗基因工程产品法医学检测人类学研究……基因组DNA获取特定DN***段扩增特定DN***段