三氯乙烯降解菌的分离鉴定及其降解特性.doc

文档介绍：三氯乙烯降解菌的分离鉴定及其降解特性
王新新1,2,张颖1*,韩斯琴1,王元芬1,2,李慧1
1. 中国科学院沈阳应用生态研究所陆地生态过程重点实验室,辽宁沈阳110016;2. 中国科学院研究生院,北京 100049
摘要:三氯乙烯是一种具有“三致”效应的有机氯代烃化合物,作为一种重要的化工原料在工业上广泛应用,同时也造成了大量的三氯乙烯进入自然环境,引起了严重的环境污染。为获得更为丰富的三氯乙烯降解微生物资源,利用水-硅油双相系统从实验室高浓度三氯乙烯胁迫底泥中,分离筛选得到两株三氯乙烯降解菌WF1、FT10。在三氯乙烯初始质量浓度为5 mg·L-1的条件下,培养72 h,菌WF1、%、%;在500 mg·L-1乙酸钠作为共代谢基质的情况下,%、%,降解速率明显提高。根据形态学观察、16项生理生化实验和16S rRNA序列分析结果,将菌株WT1归为Achromobacter xylosoxidans,将菌株FT10归为Sporosarcina aquimarina。对菌株培养条件进行优化,经SlideWrite统计软件拟合, ℃ ℃,。
关键词:三氯乙烯;降解菌;分离鉴定;底泥;无色杆菌;八叠球菌
中图分类号:X172 文献标识码:A 文章编号:1672-2175(2008)05-1778-06
三氯乙烯是一种易挥发的有机氯代烃化合物,作为一种优良的溶剂广泛应用于多个行业。由于不合理的废水排放和意外泄露,它被大量释放到环境中,成为底泥水体中常见的污染物之一[1]。因其分布广泛且具有致畸、致癌、致突变等潜在危险[2-3],许多国家都已将其列入优先控制污染物黑名单[4],因此探索高效便捷的处理方式具有重要意义。利用微生物降解三氯乙烯的方法具有去除率高、成本低等优点,因而在三氯乙烯污染治理中备受关注[5-6]。目前国际上已经分离到了可以降解三氯乙烯的多种微生物,主要有Pseudomonas、Methylocystis、Xanthobacter、Methylosinus、Desulfuromonas、Alcaligenes、Ralstonia、Burkholderia、Mycobacterium、Janibacter、Nitrosomonas等[7-10],然而国内三氯乙烯污染治理相关的研究甚少,三氯乙烯降解菌方面的研究更为罕见。本研究从实验室高浓度三氯乙烯污染底泥中,经富集驯化筛选得到两株三氯乙烯降解菌,通过菌种鉴定确定其分类地位,并探索了降解菌的最适培养条件,以期为修复三氯乙烯污染提供理论依据。
1 实验材料与方法
仪器
GNP-9080型恒温培养箱、GLC-3型超净工作台、LDZX-40型自动高温灭菌锅、HZQ-C型气浴恒温摇床、PTC-100TM型PCR仪、GENIE-2型旋涡混合器、5415 C型高速离心机、DYY-6B型电泳仪、Bio-Rad凝胶呈像系统、XSP-8CZ型显微镜、752型紫外可见分光光度计、Agilentһ6890气相色谱仪。
实验材料
主要试剂:三氯乙烯、硅油(聚甲基硅醇)、蛋白酶K、TaK