文档介绍：Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialuse台微生物菌种常规保藏技术规程(试行)《自然科技资源收集、整理、保存技术规程研究与制定》项目组二〇〇四年十二月十日目次前言………………………………………………………………………………………2引言………………………………………………………………………………………31范围…………………………………………………………………………………………42定义…………………………………………………………………………………………43基本原则……………………………………………………………………………………54方法…………………………………………………………………………………………5附录 A定期移植保藏法…………………………………………………………………6附录 B液体石蜡保藏法…………………………………………………………………9附录 C沙土管保藏法…………………………………………………………………11参考文献……………………………………………………………………………………13前言本规范由台建设项目提出。本规范起草单位:中国农业科学院土壤肥料研究所、中国食品发酵工业研究院、中国兽医药品监察所、中国科学院微生物研究所、中国林业科学研究院森林保护研究所、中国药品生物制品检定所、中国医学科学院医药生物技术研究所。本规范主要起草人:程池、李金霞、胡海蓉、姜瑞波、顾金刚、周宇光、朴春根、叶强、张月琴、陈敏等。引言微生物菌种常规保藏是一类重要的基本操作技术,广泛应用于科学研究、教学及生物技术产业,是保护微生物菌种资源的重要手段,是科研教学及生物技术产业正常运转的重要保障。本规程包括定期移植保藏法、液体石蜡保藏法和沙土管保藏法三种常用微生物菌种保藏方法。制定本规程是为了规范微生物菌种常规保藏技术操作,加强管理,以达到保护微生物菌种资源,利用微生物菌种资源及实现资源共享的目的。微生物菌种常规保藏技术规程1范围本规程规定了微生物菌种常规保藏技术的基本原则和方法。本规程适用于微生物菌种的常规保藏工作。2定义本规程采用下列定义。、具有实际或潜在实用价值的古菌、细菌、真菌、病毒、细胞株等及其相关信息数据。,避免死亡、污染,保持其原有性状基本稳定。,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4℃-6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。,定期移植保藏法的辅助方法。是指将菌种接种在适宜的斜面培养基上,最适条件下培养至菌种长出健壮菌落后注入灭菌的液体石蜡,使其覆盖整个斜面,再直立放置于4℃-15℃进行保存的一种菌种保藏方法。。是指将培养好的微生物细胞或孢子用无菌水制成悬浮液,注入灭菌的沙土管中混合均匀,或直接将成熟孢子刮下接种于灭菌的沙土管中,使微生物细胞或孢子吸附在载体上,将管中水分抽干后熔封管口或置干燥器中于4℃-15℃进行保存的一种菌种保藏方法。。,不能对周围环境造成污染和危害。。。。定期移植保藏法适用范围本方法适用于大多数细菌和真菌。原理低温条件下保藏可减缓微生物菌种的代谢活动,抑制其繁殖速度,达到减少菌株突变,延长菌种保藏时间的目的。保藏培养基一般含较多有机氮,糖分总量不超过2%,既能满足菌种培养时生长繁殖的需要,又可防止因产酸过多而影响菌株的保藏。技术要求不同菌种应根据要求选择合适的培养基。接种时要求无菌操作,避免染菌。保藏期间要定期检查菌种存放的房间、冷库、冰箱等的温度、湿度,各试管的棉塞有无污染现象,如发现异常应取出该管,重新移植培养后补上空缺。大量菌种同时移植时,各菌株的菌号、所用培养基要进行核对,避免发生错误。每次移植培养后,应与原保藏菌株和菌株的登记卡片逐个对照,检查无误后再存放。斜面菌种应保藏相继三代培养物以便对照,防止因意外和污染造成损失。方法与步骤培养基制备器皿准备培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸管等,根据不同情况洗涤、干燥、包装、灭菌后使用。溶解培养基配料先在烧杯中放适量水,按培养基配方称取各