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ABO血型鉴定.doc

上传人:wz_198613 2019/3/14 文件大小:28 KB

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ABO血型鉴定.doc

文档介绍

文档介绍:ABO血型鉴定(生理盐水法),将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。A型红细胞膜上含有A抗原,B型红细胞膜上含有B抗原,AB型红细胞膜上含有A、B抗原,抗A、抗B试剂是分别针对A抗原和B抗原的特异性抗体。可利用红细胞凝集试验,通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型,是用已知的抗A、抗B试剂与受检者的红细胞混合时,与抗A试剂发生凝集者即为A型,与抗B分型试剂发生凝集者即为B型,与抗A、抗B试剂均发生凝集者即为AB型,与抗A、抗B试剂均不凝集者即为O型。所谓反定型,是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗-A或/和抗-B。:新抽取的抗凝血或手指末梢血和血清。::如用抗凝血,多主张用EDTAK2(㎎/dL)抗凝。,最少样品量为100ul,如手指有冻疮,则主张采耳垂血。:2小时内完成实验,室温放置下不超过8小时,4℃-8℃保存不超过48小时。::细菌污染、:::抗A分型试剂(蓝色),效价1:128,2℃-8℃避光保存,室温放置不宜过久。试剂2:抗B分型试剂(黄色),效价1:128,2℃-8℃避光保存,室温放置不宜过久。试剂3:5%A、B及O型红细胞盐水悬液,自制。配制方法:分别采取已知A、B、O三种血型的红细胞,经盐水洗涤3次,以压积红细胞配成不同浓度的红细胞悬液。红细胞悬液的配制悬液浓度(%)压积红细胞(滴)盐水(滴)25102011112ml(40)(16)(8)(4)为了防止红细胞悬液敏感性不一致,可随机采取3个或以上的健康***血液,按A、B、O型分别混合后,按上法制备。(或白瓷板1块),用肥皂水刷洗后晾干,用蜡笔划出小格,并注明A、B字样。将抗A试剂、抗B试剂各一滴分别滴于玻片(或瓷盘)上A、B处。分别取等体积待检血样(5%-10%红细胞悬液或全血)于抗A试剂和抗B试剂。(或白瓷板1块),用蜡笔划成方格,标明A细胞、B细胞和O细胞,用滴管各加受检者血清1滴,再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。,同时不停的摇动玻片(或瓷盘)并观察血型凝集(或溶血)反应。如以玻片做试验时,也可用低倍镜观察结果。(内径10mm×60mm)2支,分别标上A、B字样,用滴管分别向A管滴加抗A分型试剂1滴。向B管滴加抗B分型试剂1滴。向A、B管各滴加待检血样的5%红细胞悬液各1滴,混合。(内径10mm×60mm)3支,分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清1滴于试管底部,再分别以滴管加入A、B和O型5%红细胞悬液1滴,混合。。将试管轻轻摇动,使沉于管底的红细胞浮起,先以肉眼观察有无凝集(或溶血)现象。如肉眼不见凝集,应将反应物倒于玻片上,再以低倍镜检查。