文档介绍：Forpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialuseForpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialuseForpersonaluseonlyinstudyandresearch;mercialuse蒅检测项目名称:25-羟基维生素D2/D3检测袃一、检测平台介绍(检测方法、采样步骤、检测试剂、检测仪器)袁1、检测方法:串联质谱技术蚆VitD(VitaminD),主要由人体皮肤经紫外线照射合成,具有调节人体钙磷代谢,防治儿童佝偻病、骨质疏松的重大作用。近年来发现充足的VitD对于心血管、糖尿病、肿瘤、免疫性疾病起到预防作用。传统研究认为,VitD参与调节体内钙、磷代谢,维持骨骼健康。近年来的研究发现,VitD的作用远不止维系骨骼健康那么简单,它具有极广泛的生理功能,VitD受体存在于身体的大部分组织中,在许多常见病的发生发展中,都可见到VitD的影子,肿瘤、糖尿病、高血压、心血管疾病和自身免疫性疾病等多种疾病都与VitD缺乏相关。芄VitD(VitaminD)是一种脂溶性维生素,根据来源不同可以分为2大类:羃▪VitD2(麦角钙化醇),主要来源于植物性食物,人体自身无法合成。羈▪VitD3(胆钙化醇),主要由人体皮肤经紫外线照射合成,少量来源于动物性食物。莇无论是VitD2还是VitD3都需要经过血液循环转运至肝脏,在肝酶的作用下首先转化为25-羟基维生素D(25(OH)VitD),25(OH)VitD再转运到肾脏,经过第二次羟化形成1,25(OH)2VitD,二者均能发生生物作用。羃目前国内外血清25OHD的检测有传统方法如放射免疫、竞争蛋白结合法等,也有高效液相色谱、高效液相色谱-串联质谱法等新兴方法。传统技术由于方法特异性及抗基质干扰能力较差,且有些方法不能同时准确测定25OHD2和25OHD3的含量,因此无法准确反映出血清25OHD浓度。串联质谱法检测人血清25OHD,能同时准确测定25OHD2和25OHD3的浓度,且方法特异性好、抗干扰能力强,被公认为是检测人血清25OHD的金标准。肃液相串联质谱(LC-MS/MS):两个或更多的质谱连接在一起,称为串联质谱。最简单的串联质谱(MS/MS)由两个质谱串联而成,其中第一个质量分析器(MS1)将离子预分离或加能量修饰,由第二级质量分析器(MS2)分析结果。最常见的串联质谱为三级四极杆串联质谱。第一级和第三级四极杆分析器分别为MS1和MS2,第二级四极杆分析器所起作用是将从MS1得到的各个峰进行轰击,实现母离子碎裂后进入MS2再行分析。莈MS/MS最基本的功能包括能说明MS1中的母离子和MS2中的子离子间的联系。根据MS1和MS2的扫描模式,如子离子扫描、母离子扫描和中性碎片丢失扫描,可以查明不同质量数离子间的关系。袅MS/MS在混合物分析中有很多优势。在质谱与气相色谱或液相色谱联用时,即使色谱未能将物质完全分离,也可以进行鉴定。MS/MS可从样品中选择母离子进行分析,而不受其他物质干扰。肅液相串联质谱(LC-MS/MS)主要用于分析GC-MS/MS不能分析,或热稳定性差,强极性和高分子量的物质,如生物样品(药物与其代谢产物)和生物大分子(肽、蛋白、核酸和多糖)。膃液相串联质谱(LiquidChromatograph