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艾姆斯实验.doc

上传人:小枷 2019/3/23 文件大小:21 KB

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艾姆斯实验.doc

文档介绍

文档介绍:是艾姆斯以组氨酸缺陷型的鼠伤寒沙门菌突变株为测试指示菌所进行的致突变...后者可在缺乏组氨酸的培养基上长成菌落。此法检测的阳性结果与动物致癌性有90%相符率,其假阳性率和假阴性率均为10%左右,是检测化学物诱变作用的较好方法,可供致癌物快速初筛之用。美国生物化学家和遗传学家。生于纽约市。...发明一种简单、有效的检测环境诱变剂的方法,即“艾姆斯试验”。艾姆斯教授是环境化学物致突变、致癌性快速检测系统之一—艾姆斯试验(Ame”Test)的创始人。当前,环境污染与人类肿瘤的关系受到普遍重视,要确定一个化学物对人类是否有潜在致癌性,是一个重要而复杂的问题。艾姆斯试验是当前快速检测化学物致突变性、致癌性的较简便的方法之一,且已为世界上2千多个实验室所采用。我校农药毒理研究室于1977年开始移植该试验成功,并检测了一批化学农药及其他环境化学物致突变性、致癌性,获得了较满意的结果。艾姆斯试验(Amestest)是快速地鉴别化学品、新农药和新食品添加剂的致癌性,作为致癌物质的筛选法而被广泛应用,可以检测许多物质的致癌性。原理是用遗传学方法培植一种不能自行制造组氨酸的鼠伤寒沙门氏菌的变异体,这种菌株在无组氨酸的培养基中不能生长。如果将这种菌株与化学致癌物一起培养,则可使其dna(脱氧核糖核酸)再次突变,恢复到能制造组氨酸的原型(野生型),即在无组氨酸的培养基中也能生长。利用这一特征性变化来测试化学物质有无致突变作用,并根据生长的菌落数目还可以判定其致癌性的强弱。有些烷化剂例如氮芥、硫芥和环氧乙烷等除了能诱发各种点突变外,还能诱发一般只有辐射才能诱发的染色体畸变,所以它们也被称为拟辐射物质。由于一切生物的遗传物质基础都是核酸尤其是DNA,所以,任何能改变核酸结构的因素都可引起核酸生物学功能的改变,例如会引起生物的"三致"(致突变,致畸变,致癌变)。同样,凡能引起核酸的其他功能改变的因素,一般也能引起突变。这是"生物化学统一性"法则的一个具体例证。具体地说,凡有致突变效应的因素,一般都有致癌、致畸效应,反之亦然;凡对原核生物有效的因素,一般对非细胞生物和真核生物也有效;凡能引起易鉴出的选择性突变的诱变因素,一般也能引起难以检出的非选择性突变;凡能引起负变的因素,一般也可引起正变;凡能引起回复突变的因素,一般也能引起正向突变;凡能诱导溶源菌裂解的因素,一般亦能引起突变;等等。这样,我们就有可能利用最简单、方便和快速的生物模型来研究最复杂、烦琐、迟缓或难以检出的有关生物学问题了。70年代中期所发明的利用微生物营养缺陷型的回变来检出化学致癌剂的艾姆斯试验(Amestest),就是巧妙地利用诱变剂作用共性原理的一个突出例子。用艾姆斯试验测定潜在化学致癌物的基本原理是:Salmonellatyphimurium(鼠伤寒沙门氏菌的组氨酸缺陷型(hisˉ)菌株在基本培养基[-]的平板上不能生长,如发生回复突变则能生长。含可疑"三致"物例如黄曲霉***、二甲氨基偶氮苯(奶油黄)或"反应停"的试样,加入鼠肝匀浆,保温一段时间后,吸入滤纸片中,然后将滤纸片放置于上述平板中央。经培养后,出现三种情况:如在平板上无大量菌落产生,说明试样中不含诱变剂;如在纸片周围有一抑制圈,其外才是大量菌落,说明试样中某诱变剂的浓度很高;如在纸片周围即长大量菌落,说明诱变剂的浓度合适(图8-19)。顺便要解释的是