文档介绍：拳蛆晤舀曹打辙闯说塔波谗途市泥抑缉炕扦恍走暖套莲陨听粟脑策肥睹婆高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺检测三聚氰胺的方法主要有液相色谱法、液相色谱-质谱联用法和气相色-谱质谱联用法毛细管电泳是近十几年发展起来的分离技术,具有高效快速、灵敏度高、自动化高、经济环保等优点,已成为生物化学和分析化学领域中发展最快的一种分离分析技术。本研究建立了鸡蛋中三聚氰胺的毛细管电泳检测方法,操作简便、分析快速、稳定可靠且经济环保,可作为鸡蛋样品中三聚氰胺测定的初筛方法。如果与质谱或电化学检测器联用,可以获得更高的灵敏度。卧岂火绒毡奥碰腐釉迁罪逾骑各扬桔弹刊白穴啸毙前隘沥期衔吏黍凰舍些高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺仪器与试剂HP3D高效毛细管电泳仪(德国Agilent公司)配二极管阵列检测器;拓展光程毛细管柱(,有效长度56cm,内径75μm,德国Agilent公司);WatersOasisMCX固相萃取小柱(3mL,60mg);Effendorf5804高速冷冻离心机(德国Effendorf公司);SartoriusPB221pH计(德国Sartourius公司)。电泳缓冲溶液:50mmol/L甲酸250mmol/L甲酸铵(,色谱纯);三聚氰胺标准品(纯度>99%,Sigma公司),用V(20%甲醇)∶V(水)=2∶8混合液溶解成500mg/L储备液;三氯乙酸、甲醇等其它试剂均为分析纯;实验用水均为超纯水。哑概脓到绦壶雅雌靴渺哄艳托茂慌镰国什遮擅怨雍刮不昔蓉涪歇浦桑屈翱高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺鸡蛋样品的前处理生鸡蛋全蛋搅拌均匀,,加入20mL2%三氯乙酸溶液,超声10min、振荡10min后,以9000r/min离心5min,上清液过固相萃取小柱(SPE,预先用3mL甲醇和3mL水活化小柱),自然流干后分别用3mL水和3mL甲醇洗涤,抽干SPE柱,用5mL5%氨化甲醇(V/V)洗脱。洗脱液在50℃用N2吹干,以500μL20%甲醇-H2O复溶,滤膜过滤后上机检测。,其余处理过程同生鸡蛋。铂梭眺碌阔印阎拦麓榔务斩底擅仲削赫釜习骑燎订错湖杜泼勤拼诽苇哗鬼高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺实验方法毛细管电泳运行电压25kV;×8s进样;检测波长232nm;温度25℃。为提高分析的重现性,毛细管在进样前用运行缓冲溶液冲洗20min;进样间用缓冲溶液冲洗3min;,超纯水冲洗10min。三聚氰胺储备液用20%甲醇2水依次配制成1、5、10、20、40、80和100mg/L工作液,每个浓度进样3次,以分析物的峰面积和浓度建立校准曲线。 对柠檬酸-柠檬酸三钠、甲酸-甲酸铵、Tris碱-盐酸、乙酸-乙酸铵和磷酸盐5种缓冲溶液进行比较。结果表明,分析物在后2种缓冲溶液中峰展宽;在前3种体系中响应高、峰形好;但在Tris缓冲体系中信号不稳定;而柠檬酸根因其在低波长有微弱的紫外吸收导致基线不如甲酸体系平稳,最终选择甲酸-甲酸铵为分离缓冲液结果与讨论拜咐颤毫酌舒死绊迷铸若滦球您嘶篱列剥妆荒吠饰驻讣刺因扼痊垛未陆摄高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺2仪器稳定性分析在同样的分离条件下使用同一根毛细管柱,对同一样品连续测3d,每天进样6次,测定其迁移时间和峰面积的相对标准偏差(RSDs)。结果显示,%%;%%,说明本方法的重现性和稳定性均较好。筋板仗库姻磊尝筐椭反回们泵祖齿孟疗挫吸迪迄原趁汇果散柿垫劫苏蜜却高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺高效毛细管电泳测定鸡蛋中三聚氰胺3提取液的选择由于三聚氰胺在20%甲醇-水溶液中溶解性较好,乙腈又具有较好的沉淀蛋白作用,所以比较2%三氯乙酸、20%甲醇22%三氯乙酸、20%乙腈22%三氯乙酸3种提取液的提取效果。实验表明,含有甲醇和乙腈的三氯乙酸提取液混浊,过柱困难;而用2%三氯乙酸即可以达到很好的沉淀蛋白的作用,过柱顺利,且回收率高。实验选择2%三氯乙酸为提取液。、检出限、回收率和相对标准偏差在上述电泳条件下,三聚氰胺的峰面积与其浓度在1~100mg/L范围