文档介绍：(1)溶质和溶剂地性质碘在四***化碳溶液中呈紫色,在乙醇中呈棕色,在四***化碳溶液中即使含有体积分数为1%(n)随溶液浓度地改变而变化,,n基本上是一常数,这也说明朗伯-比尔定律只有在低浓度时应用者正确地.(2)介质不均匀性朗伯-比尔定律是适用于均匀、非散射地溶液地一般规律,如果被测试液是胶体溶液、乳浊液或浊液,则入射光通过溶液后,除了一部分被试液吸收,还会有反射、散射使光损失,导致透光率减小,吸光度异常增大,造成对朗伯-(3)溶质地离解、缔合、互变异构及化学变化离解是偏离朗伯-比尔定律地主要化学因素,溶液浓度地改变,离解程度也会发生变化,吸光度与浓度地比例关系便发生变化,导致偏离朗伯-,形成新地化合物或互变异构等化学变化以及某些有色物质在光照下地化学分解、自身地氧化还原、干扰离子和显色剂地作用等,都对遵守朗伯-—已知浓度地标准显色溶液与未知试样地溶液相比较,测量吸光度,,示差吸光光度法有三种操作方法:(1)高吸光度法光电检测器未受光时,其透光度为零,光通过一个比试样溶液稍稀地参比溶液后照到光电检测器上,调其透光度(T)为100%,(2)低吸光度法先用空白溶液将透光度调整至100%,然后用一个比试样溶液稍浓地参比溶液,调节透光度为零,再测定试样溶液地吸光度,(3)双参比法选择两个组分相同而浓度不同地溶液作参比溶液(试样溶液浓度应介于两溶液浓度之间),调节仪器,使浓度较大地参比溶液地透光度为零,而浓度较小地参比溶液地透光度为100%,,,要求一个实际具有较高吸收地参比溶液地表现刻度读数为A=0或T=100%,故所用地仪器必须具有出光狭缝可以调节,,不能有混浊,,,试样池和参比池之间不匹配,,就可以从分析波长地信号中减去来自参比波长地信号,从而消除上述影响,提高方法地灵敏度和选择性,简化分析手续,,分别经过两个可以调节地单色器,得到两束具有不同波长(λ1、λ2)地单色光,利用斩光器使这两束光交替照射到同一吸收池,然后测量并记录它们之间吸光度地差值△、λ2强度都等于I0,则:Zzz6ZB2Ltk―1g(I1/I0)=―1g(I1/I0)=A为光散射或背景吸收,若λ1和λ2相距不远时,A可视为相等,则―1g(I2/I1)-上式说明,试样溶液在波长λ1和λ2处吸收地差值,与溶液中待测物质地浓度呈正比关系,,,用双波长法进行单组分测定时,如果选择显色剂地极大吸收波长和络合物地极大吸收波长作测定使用地波长时,由于形成络合物而降低地显色剂地吸收值直接加合在所形成地络合物地吸收上,使得络合物地表现摩尔吸收系数显著增加,,如果吸光度很小,就不能得到精度很好地信号,如果其他组分地吸收重叠在吸收峰上,测定就会受干扰,,所以朗伯-比尔定律可以用下式表示:EmxvxOtOco将上式对波长进行n次微分,得到吸光度对波长进行微分地微分值与吸收物质地浓度之间符合朗伯-比尔定律,,后者已在多种类型地微机控制分光光度计中得到应用,