文档介绍：新疆石榴皮等9种天然药物植物雌激素活性的实验研究
作者:帕丽达·阿不力孜,王晓文,热娜·卡斯木‘
【摘要】目的对几种天然药物进行植物雌激素的活性筛选。方法采用人乳腺癌细胞增殖法与酵母菌雌激素筛检实验法对9种天然药物进行了植物雌激素活性的研究。结果成功地建立了E-SCREEN法与Yeast Estrogen Screen实验法,此两种方法均可检测到1×10-13 mol/L的雌二醇。MCF-7细胞增殖实验结果表明,鹰嘴豆、新疆石榴皮、罗勒、枸杞水提取物可促使ER(+)MCF-7细胞的增殖(P<),提示它们具有植物雌激素样活性;酵母双杂交(Yeast two-hybrid)系统实验结果表明,鹰嘴豆、石榴皮水提取物均能使酵母系统中的β-半乳糖苷酶的活性增强(P<),提示它们具有植物雌激素样活性。结论E-SCREEN法敏感性高,并有快速、简便等优点,适用于大量化合物的初选。
【关键词】人乳腺癌细胞增殖法; 酵母菌雌激素筛检实验; 雌激素活性
长期以来,许多中草药植物被广泛应用于妇科病的治疗和保健[1],中药所含植物雌激素成分在其中发挥的药效作用不容忽视。因与雌激素化学结构相似[2],植物雌激素是植物中可以与哺乳类动物及人类的雌激素受体(Estrogen Receptor, ER)相结合并将其激活的一类化合物,被证实存在于包括中草药在内的多种植物中,而且在体内具有双向调节作用,即一方面在体内雌激素水平较低时,可与ER结合发挥雌激素样作用;另一方面,在体内雌激素水平较高时,植物雌激素可通过竞争性结合靶细胞ER而产生抗雌激素样作用,即减弱靶细胞对雌激素的应答。因此,近年来植物雌激素又被称为
“选择性雌激素受体调节剂”(selective estrogen receptormod-ulators, SERMs)或中药选择性雌激素受体调节剂。对中药植物雌激素活性筛选、活性成分及其作用机制、特别是关于这些成分对雌激素依赖性肿瘤细胞增殖的影响的研究尚不够深入。本研究在上报的茯苓等中药雌激素活性筛选的基础上,选择课题组正在研究的富含黄酮类、香豆素类、木脂素类及二苯乙烯类成分的新疆石榴皮、红景天、罗勒、阿里红、枸杞、肉苁蓉、锁阳、鹰嘴豆、新疆鼠尾草等9种天然药物,对其植物雌激素活性进行了初步的筛选。
1 材料与仪器
药物新疆石榴皮Punica granatum L. (购自新疆南疆);罗勒Ocimun basilicum L. (采自新疆吐鲁番市);红景天Rhodiola rose L.(购自新疆伊宁霍诚县);阿里红Fomes officinalis Ames.(购自新疆维吾尔医院);鹰嘴豆Cicer arietinum L.(购自新疆维吾尔医院);枸杞Lycium barbarum L. (购自新疆中新药业公司);肉苁蓉Cistanche salsa.(采自新疆吉木萨盐生肉苁蓉人工栽培基地);锁阳Cynomorium songaricum Rupr.(购自新疆乌鲁木齐市);鼠尾草Salvia deserta Schang.(采自乌鲁木齐市近郊)。各药材分别用10倍量水煮提2次,过滤,合并滤液并减压浓缩,真空干燥后配制成1 mg/ml的水提液。
试剂EMDM培养基、无酚红EMDM培养基、17β-雌二醇、β-半乳糖苷