文档介绍：摘要目的观察冬虫夏草对小鼠抗体形成细胞的作用。方法用100浓度冬虫夏草浸出液定期给小鼠灌胃,然后进行小鼠抗体产生能力检测、特异玫瑰花环结形成细胞检测、血清检测。结果用药组以上3项免疫学指标均增高。结论冬虫夏草有明显促进抗体形成细胞的作用。关键词冬虫夏草;免疫功能;小鼠冬虫夏草,始载于《本草纲目拾遗》。因其冬季为虫,夏季为草,故名。为麦角菌科真菌冬虫夏草,寄生蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。主产于四川阿坝藏族自治州松潘、理县、茂汶羌族自治县、甘孜藏族自治州、德格、道孚、青海玉树、果洛藏族自治州及同德、同仁,云南中甸、德钦、丽江纳西族自治县等地,均为野生。主要功效益肾补肺,止血化痰,止嗽定喘。本实验主要研究冬虫夏草对抗体形成细胞作用,旨在为冬虫夏草的临床应用提供科学依据。一、器材与方法11仪器和药物低温冷冻离心机,美国;美国产全自动酶标仪;恒温水浴箱上海;电泳仪上海;100目不锈钢网。冬虫夏草购于附属医院中药房,取100加水1000,文火煎煮2,去渣浓缩为100浓度为100备用。 12动物及分组取纯系小鼠24只,体重18~22,雌雄各半,随机分为两组,每组12只,Ⅰ组为生理盐水对照组,Ⅱ组为药物实验组。 13方法Ⅰ组用生理盐水灌胃,1次,05次·只;Ⅱ组用冬虫夏草液灌胃,1次,05次·只,共灌10次。 14检测项目141定量溶血分光光度测定法本法体外测定细胞产生分泌抗体裂解红细胞所释放的血红蛋白量以值表示,其结果可反映机体体液免疫功能。实验第5天分别将5的绵羊红细胞02注入各组小鼠腹腔内。第11天颈椎脱臼处死小鼠,常规取脾脏,然后脾细胞计数,调整细胞浓度至1×107,平均每组每只小鼠设3支试管,每管依次加脾细胞悬液,02绵羊红细胞,1∶10新鲜豚鼠血清补体各1混匀。另外分别设补体、脾细胞以及对照管各3支,置37℃水浴温育1,2000离心5。取上清液用96孔细胞培养板于全自动酶标仪450波长处测值,作为反应值。 142特异玫瑰花环形成细胞检测取脾细胞011×107,101,小牛血清01,试管内混匀,4℃放置2,加结晶紫溶液20μ,计数500个淋巴细胞,求出106脾细胞的形成率。 143血清检测采用对流免疫电泳实验,摘除小鼠眼球取血,分离血清,取不同稀释度血清10μ加入阴极端琼脂板孔中,将琼脂板阳极端孔内加入羊抗鼠1∶3210μ,将对流免疫电泳通电30后观察结果,以血清最高稀释度仍有明显沉淀线为准。结果以稀释度表示。二、结果21冬虫夏草对抗体形成细胞的影响表1结果显示,用药组可促进抗体细胞形成,与对照组相比有显著性差异22冬虫夏草对的影响表2结果显示,用药组产生明显增强,与对照组相比有非常显著性差异23冬虫夏草对小鼠的影响表3结果显示,用药组可明显促进产生,与对照组相比有显著性差异三、讨论冬虫夏草是临床上常用的中药。现代药理研究证实,冬虫夏草能显著增加小鼠血清溶菌酶的含量,极显著地提高绵羊红细胞的滴度,也能提高巨噬细胞的吞噬功能,提高淋巴细胞转化率和自然玫瑰花环形成率,且能明显增加血清的含量。尚有抗心肌缺血和心律失常的作用、抗应激作用、抗衰老作用、抗炎作用及抗肾衰作用。本研究重点从细胞及分子水平探讨冬虫夏草对抗体形成细胞,分子的影响。实验证明,冬虫夏草能增强小鼠抗体形成细胞活性,促进细胞分化、增殖为浆细胞;药物组与对照组相比有显著性差异[1]高学