文档介绍：微藻藻种的分离筛选技术
培养微藻,首先要从天然海水中分离出所需要的“单种”或“克隆”,如果在培养过程中,一旦发生杂藻污染或遭到虫害。必须重新进行藻种的分离,以保证藻种具备“单种”或“克降”的特性。
微藻培养者根据各自的经验和习惯,创造了各式各样的藻种分离筛选方法,已有十几种之多。最常用的方法是微细吸管法、小水滴法和琼脂平板法。
微细吸管法最常用,是取得“单种”或“克隆”的最可靠的方法之一。但操作技术要求高,在显微镜下,先用猪眼睑毛做成的解剖针,将水滴中杂物和不需要的藻细胞,拨向一边,将所需的藻细胞拨向另一边;对于有趋光性的鞭毛藻,可在一侧投入光线,则所要选的鞭毛藻游向有光一侧,杂质留在原处,这样用玻璃微细吸管吸取所需的藻细胞就比较容易,另外,对个体较大的种类,可在双筒解剖镜下操作,将微细吸管内的藻细胞轻轻吹入浅凹栽玻片上或栽玻片上的水滴中,为达到纯培养,微藻细胞最好经数次洗涤,即吹入另一滴之后,再吸出吹入另一滴灭菌培养液水滴中,反复称出洗涤几次,最后经镜检确认水滴中是要筛选的一个藻细胞之后,再接种试管中,或将含有藻细胞的一段毛细管用消毒镊子夹断,放入接种试管中。
小水滴法比较方便易行,先将24乘24毫米的盖玻片,用割针剂安瓿的小砂轮分割成8乘8毫米的9小块,洗净晾干,装在培养皿中,干燥灭菌,把这些小块玻片排列在灭菌的栽玻片上,在每块小玻片上,滴一小滴含有微藻的水样,水滴的大小,以在显微镜低倍镜下能看清水滴的全部或大部分,稍稍移动显微镜的栽物台,就能看清整个小水滴为度,发现小水滴中只有一个所要分离的藻细胞,无其他生物混杂时,就可用消毒镊子,将该玻片夹起来,放进装有培养液的小试管中进行培养。如果不是