文档介绍：第四章生物制品生产基本技术
第一节菌种与毒种选育技术
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一、生物制品毒种的标准
生物学性状明显,历史清楚:形态、生理、生化典型、血清学、来源、代数等清楚。
遗传学纯一稳定:稳定纯一的菌种,才能制造出高质量稳定的疫苗。
免疫抗原、反应抗原好:高质量疫苗的基础。
毒力在适当范围内:灭活疫苗应该是强毒,弱毒疫苗安全,中等毒力的如ND-I系,IBD中等毒力苗。测定毒力要用敏感动物进行。
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二、强毒种的选育
1、强毒种的用途:灭活疫苗、诊断试剂、抗血清、攻毒试验。
2、强毒种来源:典型传染病分离培养;
保藏中心提供。
3、强毒种分离:
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B、致病力(动物、鸡胚、细胞试验)。
C、抗原性(免疫及反应抗原试验)
D、稳定性(传代不变异)
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(一)纯粹试验(分离培养、鉴定)。
(二)致病力测定
菌(毒)种的致病力(或称毒力)常用易感实验动物、本动物(原宿主动物)、禽胚或细胞进行测定,用半数致死量(LD50)、半数感染量(ID50)、禽胚半数致死量(ELD50)、胚半数感染量(HD50)、组织细胞半数感染量(TCID50)等来表示。
(三)抗原性测定
反应原性测定,一般采用血清学方法,以抗体滴度或效价表示。
免疫原性测定,通常采用的方法是将菌(毒)株制成疫苗,免疫动物,经1~3 周后用致死剂量的强毒攻击,以保护率表示。抗致死量强毒越多,保护率越高者,免疫原性越好。抗原性的测定,也需设阳性和阴性对照,否则无效。
(四)稳定性测定
一般采用培养基或动物、禽胚、细胞对菌(毒)株进行传代培养,观察其生物学特性,测定其致病力和抗原性,以证明其遗传性状的稳定。
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达到:毒力强,纯粹,抗原好,稳定的菌种,最后冻干保藏。这就是强毒菌种的标准。
复壮:弱毒菌种在敏感动物或细胞上多次传代,达到毒力增强的目的(日本731部队用人试验,目的是增强细菌毒力,做细菌武器使用。)。
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三、弱毒种的选育
1、用途:弱毒疫苗,诊断试剂,免疫血清。
2、来源:自然界筛选和人工诱变。
3、弱毒筛选途径:
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