文档介绍：第10章吸光光度法
概述
吸光光度法基本原理
分光光度计
显色反应及影响因素
光度分析法的设计
吸光光度法的误差
常用的吸光光度法
吸光光度法的应用
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吸光光度法:分子光谱分析法的一种,又称分光光度法,属于分子吸收光谱分析方法
基于外层电子跃迁
概述
吸收光谱
发射光谱
散射光谱
分子光谱
原子光谱
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吸光光度法基本原理
1 吸收光谱产生的原因
光:一种电磁波,波粒二象性
光谱名称
波长范围
X射线
~10nm
远紫外光
10~200nm
近紫外光
200~400nm
可见光
400~750nm
近红外光
~
中红外光
~
远红外光
~1000um
微波
~100cm
无线电波
1~1000m
当光子的能量与分子的E匹配时,就会吸收光子
E=hu=hc/l
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a 跃迁类型
价电子跃迁:σ→σ*, π→π*; n→σ*, n→π*
E (h) 顺序: n→π*<π→π*< n→σ*<σ→σ*
有机化合物的生色原理
b 生色团和助色团
生色团: 含有π→π*跃迁的不饱和基团
助色团: 含非键电子的杂原子基团,如-NH2, -OH, -CH3…
与生色团相连时,会使吸收峰红移,吸收强度增强
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物质的颜色
吸收光
颜色
波长范围( l ,nm)
黄绿
黄
橙
红
紫红
紫
蓝
绿蓝
蓝绿
紫
蓝
绿蓝
蓝绿
绿
黄绿
黄
橙
红
400-450
450-480
480-490
490-500
500-560
560-580
580-600
600-650
650-750
2 物质颜色和其吸收光关系
互补色
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吸收光谱曲线:物质在不同波长下吸收光的强度大小
A~l关系
最大吸收波长 lmax:光吸收最大处的波长
3 一些基本名词和概念
lmax
对比度(Δl):络合物最大吸收波长(lMRmax)与试剂最大吸收波(lRmax)之差
Δl
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原子光谱为线光谱
分子光谱为带光谱
电子跃迁能级
分子振动能级
分子转动能级
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4 朗伯-比尔定律
光吸收定律-朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律
吸光光度法的理论依据,研究光吸收的最基本定律
I0 = Ir + It + Ia
I0 = It + Ia
I0
Ir
It
Ia
T = It / I0 , T: 透射比或透光度
A=lg (I0 / It )=lg(1/T), A:吸光度
朗伯定律(1760年):光吸收与溶液层厚度成正比
比尔定律(1852年):光吸收与溶液浓度成正比
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当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时,溶液的吸光度与溶液的浓度及光程(溶液的厚度)成正比关系---朗伯比尔定律
---光吸收定律
数学表达:A=lg(1/T)=Kbc
其中,A:吸光度,T:透射比,
K:比例常数,b:溶液厚度,c:溶液浓度
注意: 平行单色光
均相介质
无反射、散射或光化学反应
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摩尔吸光系数 e
灵敏度表示方法
A = e bc
A = Kbc
c: mol/L
e 表示物质的浓度为1mol/L,液层厚度为1cm时溶液的吸光度。单位: (L•mol-1 •cm