文档介绍：第10章吸光光度法概述吸光光度法基本原理分光光度计显色反应及影响因素光度分析法的设计吸光光度法的误差常用的吸光光度法吸光光度法的应用吸光光度法:分子光谱分析法的一种,又称分光光度法,属于分子吸收光谱分析方法基于外层电子跃迁概述?吸收光谱?发射光谱?散射光谱?分子光谱?原子光谱吸光光度法基本原理 1吸收光谱产生的原因光:一种电磁波,波粒二象性 1~1000m 无线电波 ~100cm 微波 ~1000um 远红外光 ~ 中红外光 ~ 近红外光 400~750nm 可见光 200~400nm 近紫外光 10~200nm 远紫外光 ~10nm X射线波长范围光谱名称当光子的能量与分子的?E匹配时, 就会吸收光子? E= h?= hc/ ? a 跃迁类型价电子跃迁:σ→σ*, π→π* ; n→σ*, n→π* ? E ( h?) 顺序: n→π*< π→π* < n→σ*< σ→σ* 有机化合物的生色原理 b 生色团和助色团生色团: 含有π→π*跃迁的不饱和基团助色团: 含非键电子的杂原子基团,如-NH 2 , -OH, -CH 3…与生色团相连时,会使吸收峰红移,吸收强度增强 400-450 450-480 480-490 490-500 500-560 560-580 580-600 600-650 650-750 紫蓝绿蓝蓝绿绿黄绿黄橙红黄绿黄橙红紫红紫蓝绿蓝蓝绿波长范围( ? ,nm) 颜色吸收光物质的颜色 2物质颜色和其吸收光关系互补色吸收光谱曲线: 物质在不同波长下吸收光的强度大小 A~?关系最大吸收波长? max :光吸收最大处的波长 3 一些基本名词和概念? max 对比度(Δ?):络合物最大吸收波长(? MR max )与试剂最大吸收波(? R max )之差Δ?原子光谱为线光谱分子光谱为带光谱电子跃迁能级分子振动能级分子转动能级 4 朗伯-比尔定律光吸收定律-朗伯-比尔(Lambert-Beer) 定律吸光光度法的理论依据,研究光吸收的最基本定律 I 0 = I r + I t + I aI 0 = I t + I aI 0I rI tI a T = I t / I 0 , T: 透射比或透光度 A= lg (I 0 / I t )= lg(1/T), A: 吸光度朗伯定律( 1760 年):光吸收与溶液层厚度成正比比尔定律( 1852 年):光吸收与溶液浓度成正比当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时,溶液的吸光度与溶液的浓度及光程(溶液的厚度)成正比关系---朗伯比尔定律---光吸收定律数学表达: A= lg(1/T)= Kbc 其中, A: 吸光度, T:透射比, K: 比例常数, b:溶液厚度, c:溶液浓度注意: 平行单色光均相介质无反射、散射或光化学反应摩尔吸光系数?灵敏度表示方法 A = ?bc A = ?bc c: mol/L ??表示物质的浓度为 1mol/L, 液层厚度为 1cm 时溶液的吸光度。单位: (L? mol -1? cm -1 ) c: g/L A = abc a: 吸光系数