文档介绍：中医肝郁证的动物模型研究
【关键词】肝郁
摘要:综述了肝郁动物模型的复制方法:药物造模法和情志刺激造模法及药物+情志刺激造模法;概述了肝郁动物模型的病理改变,包括循环系统、消化系统、免疫系统及神经内分泌系统的病理改变。评析了肝郁动物模型研究存在的问题。认为建立符合中医肝失疏泄病理特点的慢性心理应激肝郁模型及肝郁模型评价标准,对动物模型病理改变进行多系统、多病种、多指标及多证型之间的比较观察,将是今后的努力方向。
关键词:肝气郁结; 疾病模型,动物;综述,指导性
肝郁气滞是中医许多疾病的共同证候和发病因素。近年来,随着生活节奏的加快,生活压力的加大,肝郁致病越来越引起医学界的注意。许多研究人员为了探讨此证的实质,在其病理生理方面进行了广泛而深入的研究。动物模型的复制是动物实验研究成败与否的关键所在。科研人员对肝郁证动物模型的复制也作了大量的研究。现将近年来有关此证的动物模型研究作一综述。
1 肝郁模型的造模方法
自1979年湖南医学院首先用艾叶注射液建立了肝郁证模型以来,国内外已相继出现了许多种肝郁模型。这些模型主要从两方面入手,一是用过量或毒性药物造成急、慢性中毒损伤来复制模型,二是通过情志刺激改变动物的生理状况来复制模型。
11药物造模法
111 艾叶注射法
艾叶性温,味苦平,入脾、肝、肾经。现代研究发现,其成分(艾叶油)有拟肾上腺的作用, 临床口服大量艾叶可引起中毒性肝炎,还对中枢神经有兴奋作用[1]。湖南医学院选用 19~28?g的小鼠,腹腔注射,用药量为?64?g・kg-1,2?d?1 次, 用药?45~60?d?即出现肝郁症状:小鼠活动增加,兴奋撕打,不易抓到[ 1 ]。另一种方法是选用大鼠以艾叶注射液?2?mL?腹腔注射,2次/d,半月后改为隔日1次;小鼠以艾叶注射液?06?mL?腹腔注射,1次/d,在注射后?40?d? 左右形成肝郁模型[2]。
112 肾上腺素皮下注射法
肖纯[3]等取动情期大鼠(180~200?g)子宫内膜片段移植于卵巢周围或腹壁内侧面,术后4~5?d伤口基本愈合后,以?1g?・L-1?肾上腺素?0 15?mL?/只,作皮下注射,每周1次,共4次。3周后,肝郁型子宫内膜异位症动物模型即成,模型动物具有中医“肝郁”的临床症状及肾上腺的病理改变。此造型方法简便易行,周期短,成活率高。
12 情志刺激造模法
肝郁证的产生多因消极应激及不良情绪体验所致。因此现在许多研究人员认为造模应从病因即情志入手,他们用各种自然激怒法复现“怒伤肝,久则郁”的临床现象来制造肝郁证动物模型。典型造模法有颈部带枷单笼喂养法、夹尾激怒打斗法和捆绑法。
121 颈部带枷单笼喂养法(模具法)
陈小野[4,5]选用?180~221?g?大鼠为实验对象,将自制的颈部枷锁套在大鼠的脖子上,模具影响大鼠日间理毛、挠痒等活动,从而引起大鼠情志变化。7 ~10?d?后,造模大鼠反应和行为迟缓,皮毛枯黄,眼睛眯小,有眼眵,甚至目赤, 粪便干、少、小,倦怠食少,爪甲紫暗,尾巴呈棕红色,且有鳞片出现。
122 夹尾激怒打斗法
须惠仁[6]主张用夹尾刺激引发大鼠打斗的方法造模。他将雄性Wistar远交系大鼠,体重?300~400?g,3~7只同置于一笼中,用尖端以纱布包裹的止血钳夹其中1只大鼠的尾巴,令其与其他大鼠打斗,从而激怒全笼的大鼠。每次刺激?30?min ,每隔?3?h?刺激1次,每天刺激4次,2?d?后大鼠间剧烈撕打减弱,饮水和吃食也明显减少,甚至不思饮食,多呈困倦状态,毛发变暗、枯黄,体重下降。
123 捆绑法
吕志平[7]等采用雄性Wistar大鼠,体重为(240±28)g,用细绷带束缚四肢,使之行走困难,并装入饲养笼内,然后定时观察并记录大鼠状态。1周后大鼠出现肝郁表现。赵益业[9]等用(20±2)g的昆明小鼠以同样的方法制作肝郁模型。另外,还可采用双后肢立式束缚激怒的方法造模,此法首次刺激?30min?,以后隔天增加?10?min,共2周[1]。
13 药物+情志刺激造模法
此法结合前两种方法,目前采用的有夹尾加肾上腺素注射法。具体方法如下:取?150?g ?左右的大鼠,用贴有胶布的夹子夹住动物的尾巴,使之保持激怒争斗状态?45?min ・d-1,同时每天皮下注射?1?g・L-1?肾上腺素?02?mL/ 只,造模时间为?30?d[5,9]。肝郁造模大鼠随着造模时间的增加,逐渐出现肝郁证的行为学特征:大鼠饮水量增加,容易激惹、咬人,喜欢扎堆、贴边,大便松散而特臭[9]。
2 肝郁模型的病理改变
中医认为肝为刚脏,喜条达,恶抑郁,主疏泄。肝主疏泄功能主要体现在调畅气机、调节血