文档介绍：液态食品中脱氢乙酸含量的高效液相色谱测定方法的研究
【关键词】液态食品脱氢乙酸含量高效液相色谱测定方法
脱氢乙酸(DHA,Dehydroacetic),别名二乙酰基乙酰乙酸,固态呈白色或淡黄色结晶粉末,无嗅、无味、熔点108~110℃,沸点270℃,是一种低毒高效防腐、防霉剂。在酸、碱条件下均有一定的抗菌作用,尤其对霉菌的抑制作用最强。我国自20世纪70年代中期开始用于食品防腐剂至今,曾用于果汁、酱菜、腐乳、人造奶油、乳酸菌饮料、果酱等食品的防腐剂[1]。虽然它的抗菌作用是有效的,但是它的毒性较大的缺点却限制了脱氢乙酸的广泛应用。脱氢乙酸能迅速被人体所吸收,进人人体后即分散于血浆和许多器官中,有抑制体内多种氧化酶的作用。目前,脱氢乙酸的安全性受到质疑,国际上已明确禁止使用,我国在一定范围内允许其使用,[2]。目前检测脱氢乙酸的国标方法为气相色谱法[3],前期样品处理过程涉及到有机溶剂萃取、浓缩等步骤,操作起来比较麻烦,而且脱氢乙酸还容易造成色谱峰出现拖尾现象,使得难以获得准确的定性和定量的结果[4]。应用高效液相色谱测定食品中脱氢乙酸的方法已见报道,比如采用超声萃取、氢氧化钠溶液浸泡等方法萃取月饼中的脱氢乙酸后再注射到色谱柱进行分离测定[5]。这些研究为应用高效液相色谱法测定果汁、罐头、瓶装腐乳等液态食品中的脱氢乙酸做了探索性的工作。本研究在国标GB/T 2003的基础上,通过对目前市场上广泛销售的多种液态食品中的脱氢乙酸以高效液相色谱的方法进行分析,取得了比较满意的结果,克服了气相色谱法前处理复杂以及污染性大的缺点。
1 材料与方法
实验样品、主要仪器与试剂
参加测定的样品主要包括目前市场上销售的果汁、腐乳、罐头以及酸奶。HP1100型高效液相色谱仪、紫外分光光度计(上海光谱仪器公司);快速混匀器。甲醇(HPLC级,DIKMA公司);甲醇(分析纯,国药);碳酸氢钠(优级纯,国药);脱氢乙酸(国家标物中心);脱氢乙酸标准溶液:精密称取脱氢乙酸标准品100 mg,用甲醇定溶至100mL。再用甲醇稀释成1、5、10、15、20、30 mg/L的标准系列溶液,。测定用水为二次蒸馏水。
样品处理
果汁和酸奶混匀后直接称取,腐乳和罐头样品需要先将固体物粉碎后再混匀。,,再加入10ml 2%的碳酸氢钠溶液,用双蒸水稀释至刻度,摇匀。,以10μl进样器加入到液相色谱仪测定。
色谱条件
色谱柱C18(5um,250×);柱温25℃;流动相选用甲醇(5:95);;进样量10ul;检测波长310nm;按照这种条件进行分析,以保留时间定性,以峰面积定量,测定样品中脱氢乙酸的浓度。
结果计算
待测样品中脱氢乙酸的含量(g/kg)=C×V×10-3/m
式中,C:样品中脱氢乙酸的浓度(mg/L);V: 样品体积(mL);m:样品质量(g)
2 结果与讨论
检测波长的确定
用紫外分光光度计对脱氢乙酸进行全波长扫描检测到两个吸收峰,在310nm处有最大吸收