文档介绍：谷氨基酸脱羧酶呙缭し捞悄虿〉氖笛檠芯摘要素的胰岛赴匾煨运鹕宋L卣鞯淖陨砻庖咝约膊 Q芯恳丫研究发现,在患者发展成为显性糖尿病之前存在一个相珿蝗衔J荰⑸⒄吞悄虿,且恢忠苑置谝鹊明,和馨拖赴⒕奘上赴染斡肓硕砸鹊築细胞的破坏,而且凋亡是胰岛赴饕5乃劳鲂问健姆⒉』剖分复杂,虽然目前仍不十分清楚,但越来越多的证据显示,赴及其细胞因子是导致胰岛赴钠苹档闹匾T颍姑庖咂胶庀较蚱颇芄谎踊荷踔猎し繲姆⒉ 4送猓珻调节性赴谖只逋庵苊庖吣褪苤蟹⒒幼攀种匾5淖饔茫导鹘谛訲细胞的产生可以有效地预防和治疗。对较长的临床前期,在此期进行有效的免疫干预有可能延缓甚至预防糖尿病的发生发展。因此,早期有效的干预方式己越来越受到人们的关注。机体重建对胰岛素自身抗原的免疫耐受是预防和治疗的重要手段之~,在目前报道的胰岛自身抗原中,谷氨酸脱羧酶的关键抗原已芯肯允綠能够通过诱导免疫耐受或者其他的机制,减轻胰岛炎,预防。呙缬捎谄渚哂邪踩愿摺⒅聘骷虻ゾ谩⒁子诖⒋嬖耸等特点,近年来已经在感染性疾病和肿瘤的预防中取得了较好的疗效。目前已有运用编码自身抗原腄疫苗对预防研究的报道,但是结果很不一致,甚至出现相反的结论。我们以前的蝗±堂焦论童主塞翅噩
类理想的动物模型——非肥胖糖尿病综上所述,本研究的目的在于:优化我们以前构建的编码全长研究结果也证明,编码人全长虻腄疫苗来说仅使人鼠糖尿病的发病率降低%左右,预防效果尚不理想,还有许多可以改进之处。虻腄疫苗,并对蠼性し溃徊教教制淇能的机制,旨在为人类的预防进一步奠定实验基础。本研究共分为三个部分:ü牧伎乖蛐蛄小⒂胂赴子基因或其他胰岛自身抗原基因共表达的方法,构建和鉴定中碌蜠疫苗,并在检测其表达。ü菇ê玫种片段呙缍訬鼠进行预防实验,观察不同蜠疫苗对筇悄虿》⒉『⒚庖吣褪堋疶免疫平衡、以及鹘谛訲细胞的作用,探讨不同蜠疫苗预防筇悄虿】赡艿淖饔没啤蕖捞觅茁廴虫塞撞要,Ⅱ
方法检测细胞因子图福谋泶铩第一部分片段呙绲墓菇ā⒓ㄓ胗呕目的构建、鉴定和优化以预防吞悄虿∥D康牡谋嗦氩煌氨酸脱羧酶蚱蔚腄疫苗。方法从柿V欣┰龀鯣片段和她蔚膃詏ń直鹩爰敢信号肽拼接,得到带信号肽的融合基因。。、儿、Ⅲ.和基因先克隆入载体后,先将融合基因分别克隆入双启动子真核表达载体中,、几.、基因克隆入真核表达载体.—校菇ǔ鰌疘疘炙ɑ蛑刈檎婧吮泶镌靥濉V刈檎婧吮泶镌靥经测序鉴定正确后,用脂质体介导的方法体外转染细胞,转染后以蛋白质印迹法检测及的表达,结果怂嵝蛄胁舛ū砻骺寺〉腟、诤匣颉⒓Ⅱ.和基因序列与报告序列一致,开放读码框正确。鞍字视〖7ḿ觳獾絊、虸贑一胞中的表达,其中融合蛋白蚐可以分泌表达。簋±堂僮论塞生塞擅墨/、/、—
方法检测到细胞因子和贑一赴械表达。结论首次成功构建了—中碌蜠疫苗,为吞悄虿〉腄疫苗预防研究提供了实验基础。关键词谷氨酸脱羧酶,呙纾诤匣颍赴蜃樱岛素,吞悄虿煌±堂焦论童主塞垴要—/.、/Ⅳ
疘/.组、『鸵鹊貉椎淖饔目的探讨优化后的蜠疫苗对筇悄虿》病和胰岛炎的作用。方法芰銷雌鼠随机分为、组、、疘组、疘疘鲎椋直鸺∪庾⑸銹、空质粒、..咖呙绾途呕蟮膒、呙纾⑸淞课,一周后重复一次,两次共W芰淇J迹恐懿饽蛱且淮危蛱茄粜院蠹嗖庋糖,连续两次血糖//凑锒衔L悄虿。卸锕鄄熘练生糖尿病或者至周龄。各组再取只周龄未发病小鼠胰腺染色观察胰岛炎情况。结果隤组相比,/和疘组筇悄虿〉姆⒉∶,还是与橄啾龋琒/隤组相比,、疘、疘疘蚐/镹鼠糖尿病的发病差异无显著性。。盟±堂僮论童生奎揸要—疘猄/一、—疘、—疘、/一—疘—、
。关键词谷氨酸脱羧酶卅逯避凇W陨砻庖咛悄虿。鹊貉祝芰涫保蘼塾隤组或与橄啾龋琾甋、/、.疘呙缂跚嵋鹊貉缀驮し繬鼠糖尿病的疗效优于./呙纾渲衟猄/和呙绲牧菩Ц谩非肥胖糖尿病小鼠堙±
细胞悬液后,【羧敕ḿ觳馄⑾赴蕴匾煨钥乖璆的刺激增第三部分蜠疫苗预防筇悄虿〉幕铺教目的探讨优选的蜠疫苗预防笠鹊貉缀糖尿病的机制。方法椤椤组、椤/组、敢楦魅—芰湮捶⒉雌鼠并处死,覵庖咦橹Х椒ḿ觳庖鹊赴牡蛲銮榭觯恢票钙殖反应;流式细胞仪检测脾细胞中鹘谛訲细胞的数量;椒ú舛ǹ乖碳ず笃⑾赴嘌锨逯蠺细胞因子Ⅲ梗赴蜃蛹ⅱ螅剑籖椒ḿ觳馄⒃嗄谙赴蜃、几、妥B家蜃觙的表达。结果、疘和疘镹鼠胰岛细胞凋亡率均低于均。/和疘镹鼠脾细胞特异性抗原刺激增殖反应低于均。、疘蚐/../和疘槠⒃嘀蠭痬泶锼平也均低于均和均。、Ⅲ.骄哂赑组..或,福组的