文档介绍：论文作者签名:叁塑塞导师签名:起强::原创性声明立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不期:幽』:』·型关于学位论文使用授权的声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。C苈畚脑诮饷芎笥ψ袷卮斯娑日
川芎嗪烟酸酯对神经细胞的保护作用研究中文摘要研究生:赵丽霞导师:郭秀丽副教授川芎嗪烟酸酯,且源ㄜ亨,为先导化合物,进行结构改造和修饰而合成的新一代川芎嗪类化合物。侵幸┐ㄜ旱闹饕;钚猿煞种唬甏岳创ㄜ亨罕挥米餮踝杂基清除剂和抗血栓、抗高血压药物、钙离子拮抗剂,广泛用于治疗心脑血管系统疾病。近年来研究表明芡腹D云琳希患谀裕绕涫悄愿桑泻芮康闹枢作用。由于肿又械募谆苋菀妆谎趸杉院退苄越洗蟮拇晃而迅速排除体外,所以谔迥诘陌胨テ诙蹋锢枚鹊汀8荻訲基本构效关系的分析,保留药效基团不变,于位甲基引入烟酸基团,合成了。烟酸有很好的降血脂、抗血栓作用,能通过维持糖酵解和调节血流量等作用,保护缺血再灌注心肌。肿又薪尤胙趟幔赡芡ü饔迷黾右┬В且能增加酯溶性,同时克服了谔迥诎胨テ诙獭⑸锢枚鹊偷热钡悖虼推测有更强的中枢作用。于是本文采用体外培养大鼠脑皮层神经细胞及人神经母细胞瘤细胞猄的方法,以低糖低氧培养造成缺糖缺氧模型和产生过量活性氧诱导细胞进入氧化应激状态,造成自由基损伤模型。通过一系列体外实验观察对受损神经细胞的保护作用并探讨了其可能的作用机制。一、对—细胞和大鼠脑皮层神经细胞氧化损伤的保护作用对氧化损伤—细胞和大鼠脑皮层神经细胞存活力的影响将孔培养板内的—细胞和大鼠脑皮层神经细胞分别置于含和~的培养液中,同时加入共同孵育造成氧化损伤模型。然后每孔加入芤·,。跤弃孔内液体,加入,待结晶溶解后于ǔげ舛ǜ骺譕值。结果显示,神经细胞氧化损伤后,细胞活力显著降低,迪陆。而·山东大学硕士学位论文
著降低氧化损伤胞内【】。.用~、·<癟】。可以增强氧化损伤神经细胞的活力,提高。对损伤—细胞和大鼠脑皮层神经细胞培养液盍Φ挠响收集造成损伤模型的神经细胞培养上清液,参照试剂盒说明书测定培养液中钚浴=峁砻鳎窬赴璈鹕撕螅赴盍档停赴ね透性增加,胞内┏鲈龆啵嘌褐蠰活力显著增加.>璗俊、及·处理的细胞,细胞活力升高,头畔灾少,.对损伤—细胞和大鼠脑皮层神经细胞内俊盍Α—活力的影响接种于孔细胞培养板神经细胞,造成损伤模型后,去除原培养液,加低渗溶液使细胞裂解,于离心∩锨逡海戳虼捅韧姿岱测俊2握帐约梁兴得魇椴舛℅—和盍Α5鞍字识坑每悸硭亮蓝法。结果显示,氧化损伤后胞内肯灾黾印与活力显著降低.>璗·及·处理后的细胞,肯灾跎;——细胞内钙离子浓度的影响接种于紫赴嘌宓腟猄赴斐蒆鹕四P秃螅占赴液,用,テ咸烟莀逑春螅尤.。的溶液与细胞于。竦幢N。洗去外液中的,留细胞悬液在流式细胞仪上绘制钙离子的平均荧光值分布图。实验结果表明,—·及·能显对损伤诱导大鼠脑皮层神经细胞凋亡的影响收集造成损伤模型的大鼠脑皮层神经细胞约个,加入细胞裂解液、蛋白酶癛崛,进行琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,凝胶成像系统拍照观察。大鼠脑皮层神经细胞经损伤后发生凋亡,狭眩碇ù笱妒垦宦畚
收集缺糖缺氧损伤模型的神经细胞培养上清液,参照试剂盒说明书测定培养液凝胶电泳呈现典型的凋亡特征一荻龋鳷。及造成损伤模型的—和大鼠脑皮层神经细胞细胞爬片,经冲洗和固神经细胞缺糖缺氧损伤后,。参照试剂盒说明书测定縂蚐活力。蛋白与—活力显著降低.>璗.?梢种粕窬赴牡蛲觯珼基本保持完整。对损伤—细胞和大鼠脑皮层神经细胞内蛋白表达的影响定,按试剂盒说明书进行用免疫组织化学方法染色。经过阳性细胞计数发现,。癟·处理后,、对缺糖缺氧损伤神经细胞的保护作用对缺糖缺氧损伤’—细胞和大鼠脑皮层神经细胞存活力的影响将孔培养板内的—细胞和大鼠脑皮层神经细胞的分别置于含。和·连二亚硫酸钠的低糖培养液中,同时加入药物共同孵育斐缮窬赴碧侨毖跛鹕四P停缓蠼蠱比色。结果显示,。及甿·4矶伎梢栽銮垦趸鹕松窬赴幕盍。对缺糖缺氧损伤—细胞和大鼠脑皮层神经细胞培养液盍的影响中钚浴=峁砻鳎窬赴碧侨毖跛鹕撕螅赴盍档停赴ね透性增加,胞内┏鲈龆啵嘌褐蠰活力显著增加.>璗、、。及甿·4