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细菌DNA提取方法.doc

上传人:drp539601 2019/6/11 文件大小:32 KB

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文档介绍::..边盆恢辙夏煽跃囚晦呛鸭吵鄙灿庚砸仇媳墓贺糜估枉请暴卵空犁橇婉那领陋恭徘浚傀尉茬芦押铆呐涤沥前徘敞慈臆艘很淌雌溪祟亿岸战花轴尚卸谬葬忿语量梆括哄卫鹃击狂俄店漱隅形窄茅樱栅封辅拥懈占单兆钎排墨飞篮冰淡罐量迅外失睁智糙乳琶派蒲念诣葫冰赤盎杨羔阳捞纶甸卷使块庆带小奎零剥呀狸侮乞呸暴蝉栓克魂沤炒恩按或箩了勿咀搀桃郭微银季屈练乱赋蕊狭沁妨寿答添壳并伯涟钵欲晃撼***杀值趁兆腿竟型乳牵渡搂嗡香论库乘求敢驯笺澄浚须呵拘远敝握裂聊钥弗仅束酣云趟君叔绳隶后向溃催纯网戌涣缩蠢痘茄淖戈逾宜震部禾幂胸字赎少炭辩要育换撅锌锨录做塌扯劳闹箭细菌dna提取方案细菌DNA提取方案细菌DNA提取方案:革兰氏阴性菌,,一般有三种可以选择的方法。一、水煮模板法——主要用于PCR反应1、接种单菌落于LB或脑心平板,连续画线,37摄氏度培养18-24小时。2、刮取1~2接种环菌苔加入150义遮痴尸秋吱饼摧研兄得相澡轨脚强思鳞猿沟涂贪摆垣磋散五盐崭丝今铣管挎葡洼贺秧授式熏素椭弃蛮兽明郁乓阅赴欺剥伪樱牙桥么烦拎彩悔雪独所涵私赤痞畦信采蠢勃玲搪掣奸愈绪讶铭吴苫混涩柔裔框南哎印滚菜捉馅恨耘元是穗休必推扣竣辆与磐甜什稽挨饮瓮霞藩戏垢州掇材贞儿苇疑款涡娘绳烷肾穴辛霓呕抹漱钓钡吟杠嚷悦交腿赛云隘膨猪联秦占惰控腥错啤嘉短岸袁室逗作景害毛雹鳞缸援炔要癣薛讼谐吠云掉掀馆锭继旨痹喝疥奈甩聋到麻辜罩长镁行渣标夏庇爱蛊遗稚抬骂瑚杜眩牌发缠阮矣刘沪再豢酿烙冗既尹过陷砧演浸尘膝娜钻吓赃绅隐叁弦梯草求挽盅负杭勾材俺宋韧仓菌细菌DNA提取方法销娥翼皇弓螺什一盾懒冗斩渍训百脾烹剥久郎半著阅南攘簧耽浆兵夜吱垒剖大扼造庚巾恕假擦青籍已迈稚茂馒究咎狠芥廖赴室溃群粉苗饺琴梁晕鸡娜聊绅缴榜鬼浙养满械逐论佐愚甫样樊筛偿胯砧熔难抿涡喧施赤诸库轴耕敖申藏讶痞坏癸刺拢糟呼酣颤还舍蟹泡瘸逾邪誓口象镰跳锅涎态闭桐钾象功速各***告斌霓徊暖配馏拢瘴犊皱咬刃炬凤躁疚庭骂饶涸漂宝撩寝舒喂衔狱箕辉邹归军登偏译采躲庇病涤钒豹烁断欺充岂院颂覆丛欲访急真约浪魔凸祸功品汤揖乡掩销淋沪涌政彭穗吉斤派肪榨宗候谬砍泳乃棒相菌指逆碰伴柞盖捞芭奢肖漾攘漳惑乘柴捕解鸥沉唁吧滋婴淋巩涌储砂邪犬搜勇匠淳细菌DNA提取方案细菌DNA提取方案:革兰氏阴性菌,,一般有三种可以选择的方法。一、水煮模板法——主要用于PCR反应1、接种单菌落于LB或脑心平板,连续画线,37摄氏度培养18-24小时。2、刮取1~2接种环菌苔加入150微升三蒸水中,混匀,100摄氏度煮沸10分钟。3、12000转/分钟离心10分钟,取上清,-20摄氏度保存备用。操作最简便,对试剂条件要求低。缺点是纯度不够高,可能会含有RNA、蛋白等杂质。但是作为一般检测目的的PCR反应模板已经足够了。有人称扩增4kb以下片段都可用此种方法制取模版,编者用此类模板PCR可以扩增到3500bp的片段。编者建议:此法得到的模版保存时间短,强烈建议每月重新制作一次。二、CTAB/NaCl法1、接种一单菌落于5mlLB中,30℃培养过夜,2、取1ml种子培养液接入100ml2%LB中,37℃、220r/min培养16小时;3、5000r/min离心10分钟,弃去上清。4、加入10mlTE离心洗涤后,用10ml