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实验二微生物分离、纯化与接种.doc

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实验二微生物分离、纯化与接种.doc

上传人:sssmppp 2019/6/12 文件大小:82 KB

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实验二微生物分离、纯化与接种.doc

文档介绍

文档介绍::..。本实验采用平板分离法:该方法操作简便,普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理是选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养成分、pH值、温度和溶解氧等要求z或者加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长,而抑制其它微生物生长的环境,从而淘汰一些不需要的微生物。微生物在固体培养基生长形成的单个菌落可以是一个细胞繁殖而成的集合体,因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。获得单个菌落的方法可通过稀释涂布平板或平板划线等技术来完成。而纯培养的确定除观察其菌落特征外,还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定,有些微生物的纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到。本实验将在混合有几种微生物菌液中分离纯化出两种微生物来。(固体)。,其中有一只盛有玻璃珠。,无菌吸管,接种环,无菌培养皿,涂布器等。4流程倒平板一制备梯度稀释液一►涂布(或划线法)一►培一匕单菌落保存。:右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边,用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拔出,试管或瓶□保持对着火焰;然后左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝,迅速倒入培养基约15ml,加盖后轻轻摇动培养皿,使培养基均匀分布在培养皿底部然后置于桌面上彳寺凝固后即成平板(教材p367图13-14)O并用记号笔标明培养基名称、菌液编号和试验日期。,左手拿皿底,右手拿接种环,挑取菌悬液一环在平板上划线(教材p367图13-15)O划线的方法很多,但无论采用哪种方法,其目的都是通过划线将样品在平板上进行稀释,使之形成单个菌落。常用的划线方法有:用接种环以无菌操作挑取菌悬液一环,先在平板培养基的一边作第一次平行划线3-4条,再转动培养皿约70度角,并将接种环上剩余物烧掉,待冷却后通过第一次划线部分作第二次平行划线,再用同样的方法通过第二次划线部分作第三次划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线。划线完毕后”盖上培养皿盖,倒置于温室培养。,一直到分离的微生物认为纯化为止。?如果不是,请分析其原因。(二),掌握无菌操作的基本环节2实验说明将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称为接种。接种是微生物实验及科学研究中的一项基本操作技术。无论微生物的分离、培养、纯化或鉴定以及有关微生物形态观察及生理研究都必须进行接种。接种的关键是严格进行无菌操作,如操作不慎引起污染,则实验结果不可靠,影响下一步工作的进行。,玻璃铅笔,火柴,试管架、接种环、接种针、滴管、移液管、三角型接种棒等接种工具。:大肠杆菌(Escherichiac