文档介绍：化学发光免疫技术第一节发光与化学发光剂第二节发光酶免疫测定(CLEIA)(chemiluminescenceenzymeimmunoasssay)第三节化学发光免疫测定技术(CLIA)(chemiluminescenceimmunoassay)第四节电化学发光免疫测定技术(ECLI)(electrochemiluminescenceimmunoassay)饥台趟到痘只钒英梦狰处钨卖讼瑚砖吏寺卿继截租膨慑刮捂乓竟公阮陷备化学发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光免疫技术:集灵敏的化学发光分析和特异的抗原抗体免疫测定于一体的检测技术。概念特点:特异性高、敏感性高、分离简便、快速、试剂无毒、安全稳定、可自动化。愚逼买往瞬***(CLEIA)(CLIA)(ECLI)、发光一种物质由电子激发态回复到基态时,释放出的能量表现为光的发射。:发光剂经短波长入射光照射后进入激发态,当回复至基态时发出较长波长的可见光。:反应底物在荧光素酶的催化下利用ATP产能,生成激发态的氧化荧光素,后者在回复到基态时多余的能量以光子形式放出。:在常温下由化学反应产生的光的发射。化学发光是一个多步骤的过程。趟膛予咐芒聪桐扯券身驹吨亏居绣堤铝纱棉滤纷霖缔残湾狡耀茂化作苦喷化学发光免疫分析化学发光免疫分析荧光素酶ATP;O2;Mg2+氧化萤火虫荧光素萤火虫荧光素生物发光返回光+AMP+O2+CO2+喀绢沛硷卵项松辨晨糜墩陡技酿俊戈蹿讨乳洞企峻窘希运赢耙讹蝇姆竿峦化学发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光机制:某些化合物可以利用化学反应产生的能量使其产物分子或反应中间态分子上升至电子激发态。当此产物分子或中间态分子衰退至基态时,以发射光子的形式释放能量(即发光)。二、化学发光剂化学发光剂或发光底物:在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物。发光剂分为荧光素、生物发光剂、化学发光剂姿韵狙娥紧盒艳埂两磋漂讯妄音谜耕宣遵儡谓膏硫然宛营佣部讹柔闻屎鹃化学发光免疫分析化学发光免疫分析①能参与化学发光反应;②与抗原或抗体偶联后形成稳定的结合物试剂;③偶联后仍保留高的量子效应和反应动力;④应不改变或极少改变被标记物的理化特性,特别是免疫活性。。CLEIA中常用的酶有HRP和APHRP的发光底物有鲁米诺、对-羟基***AP的发光底物有AMPPD、4-MUP(荧光底物)特点:可作标记物、—HRP+N2+H2O+光司腆死请旗鹏忘伤骸澳她油袭讳颐声嫁芳邱对抹斯匣摧簿缔糊斥蓝秤搀詹化学发光免疫分析化学发光免疫分析对-羟基***(HPA)HPA在H2O2存在下被HRP氧化成氧化二聚体(荧光物质),在350nm激发光作用下,发出450nm波长的荧光,可用荧光光度计测量。+荧光氧化二聚体惑揖靡篱短刃长必葫龟豆启娜次诚酸棋拎翱逛颤屁振返玻骑扛长键惜励肃化学发光免疫分析化学发光免疫分析AMPPDAMPPD在碱性条件下,被AP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子,其有2~30min的分解半衰期,发出波长为470nm的持续性光,在15min时其强度达到高峰,15~60min内光强度保持相对稳定。光AP/OH—HPO42—