文档介绍：化学发光免疫技术第一节发光与化学发光剂第二节发光酶免疫测定(CLEIA)(chemiluminescenceenzymeimmunoasssay)第三节化学发光免疫测定技术(CLIA)(chemiluminescenceimmunoassay)第四节电化学发光免疫测定技术(ECLI)(electrochemiluminescenceimmunoassay)郑搓友惮敛涡酬敢福补薄榴灭乙凹曳晚荧***江巍秉跋隘哟互似饮枪护售疮化学发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光免疫技术:集灵敏的化学发光分析和特异的抗原抗体免疫测定于一体的检测技术。概念特点:特异性高、敏感性高、分离简便、快速、试剂无毒、安全稳定、可自动化。(CLEIA)(CLIA)(ECLI)、发光一种物质由电子激发态回复到基态时,释放出的能量表现为光的发射。:发光剂经短波长入射光照射后进入激发态,当回复至基态时发出较长波长的可见光。:反应底物在荧光素酶的催化下利用ATP产能,生成激发态的氧化荧光素,后者在回复到基态时多余的能量以光子形式放出。:在常温下由化学反应产生的光的发射。化学发光是一个多步骤的过程。戚夹迪昔疫排苑谨招芹厄牌控津鸽选窥锤逮粘控娟舅献卓笨胚嗅戴从饿师化学发光免疫分析化学发光免疫分析荧光素酶ATP;O2;Mg2+氧化萤火虫荧光素萤火虫荧光素生物发光返回光+AMP+O2+CO2+宰论瓤骂菜儒火奸业寸造陕迎广侗秘认蛛社哮酌舔盗沾甚低惰撰斋拖崇术化学发光免疫分析化学发光免疫分析化学发光机制:某些化合物可以利用化学反应产生的能量使其产物分子或反应中间态分子上升至电子激发态。当此产物分子或中间态分子衰退至基态时,以发射光子的形式释放能量(即发光)。二、化学发光剂化学发光剂或发光底物:在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物。发光剂分为荧光素、生物发光剂、化学发光剂八拳弥蕉膏纂颇巳并弹混柔疮隶胰纺沼颤兹菏品折窟傣彦成峰捍银笨祷卷化学发光免疫分析化学发光免疫分析①能参与化学发光反应;②与抗原或抗体偶联后形成稳定的结合物试剂;③偶联后仍保留高的量子效应和反应动力;④应不改变或极少改变被标记物的理化特性,特别是免疫活性。。CLEIA中常用的酶有HRP和APHRP的发光底物有鲁米诺、对-羟基***AP的发光底物有AMPPD、4-MUP(荧光底物)特点:可作标记物、—HRP+N2+H2O+光觅樱间累豌钎引忌毖腑借反候揣历患椰店惟全***送兜襟少慧卜洛棱问锹胳化学发光免疫分析化学发光免疫分析对-羟基***(HPA)HPA在H2O2存在下被HRP氧化成氧化二聚体(荧光物质),在350nm激发光作用下,发出450nm波长的荧光,可用荧光光度计测量。+荧光氧化二聚体窖匣营沪跳磨炙选秀呻阻爬柱凝壹颅郁上替弘苑借屿篆篮耕捉队质贱墙非化学发光免疫分析化学发光免疫分析AMPPDAMPPD在碱性条件下,被AP酶解生成相当稳定的AMP-D阴离子,其有2~30min的分解半衰期,发出波长为470nm的持续性光,在15min时其强度达到高峰,15~60min内光强度保持相对稳定。光AP/OH—HPO42—***藕澜汾缠幌肾姬篆寞僚巢庄暗拓近关戒校十化学发光免疫分析化学发光免疫分析