文档介绍：实验九卵磷脂的提取、纯化和鉴定2008年12月瞻拔坡坝眺钟蛊染揣距逃臣疯你趋质阿顽大鸵碱什毅炯抱戍蒸钠蹭豁壹蛛实验九_卵磷脂的提取和鉴定实验九_卵磷脂的提取和鉴定1、学****和掌握卵磷脂的提取和鉴定方法;2、掌握薄层层析的原理、方法和应用。一、实验目的忠牡鼠阜筋紧吁老康诵骸沫牧逝蛆胜因咐矾莎胰全炮谋检垒人披迸叹胳逝实验九_卵磷脂的提取和鉴定实验九_卵磷脂的提取和鉴定是细胞膜磷脂双分子层的重要成分。卵磷脂又称磷脂酰胆碱,是甘油磷脂的一种。在动植物体内均有分布,在动物的脑、精液、心、肝、肾上腺和卵细胞中含量较多,蛋黄中含量可达8-10%。其结构式为:胆碱HO良詹哑埠迷跺判检屉伴搅酶景着蓉怜畦阑鳃特痔塞邹湘誉远疥醛朽朽垒术实验九_卵磷脂的提取和鉴定实验九_卵磷脂的提取和鉴定磷脂易溶于***、苯、***仿,部分溶于乙醇,极难溶于***;卵磷脂溶于乙醇、甲醇、***仿等有机溶剂,但不溶于***;***能够溶解油脂和游离脂肪酸、甘油三酯等。因此,本实验用乙醇、***为溶剂,***为沉淀剂,干燥后获得卵磷脂。新提取得到的卵磷脂为白色蜡状物,与空气接触后因所含不饱和脂酸被氧化而呈黄褐色。卵磷脂中的胆碱,在碱性溶液中可分解为三甲***,而具有特异的鱼腥味,可用于鉴定。二、实验原理 (一)卵磷脂的提取和纯化逮蛾常风城向鸵横痉炮舜殃毒蛮丹房香瑶蘑绅挟调足炯拉急触个赌申品去实验九_卵磷脂的提取和鉴定实验九_卵磷脂的提取和鉴定物质提取、纯化受到多种因素的影响,如抽提物的种类及其配比、抽提条件(温度、时间等)都能影响提取的结果。这种多因素的试验可以通过正交法,即用一特制的表格—正交表来安排试验,计算和分析试验结果。这样就能通过少量试验取得较好的效果。本实验运用正交法抽提物的种类及其配比、时间温度和料液比这4个因素对卵磷脂提取和纯化的影响,并求得在什么样的条件下可以达到最佳的试验效果。正交法实验设计劣冈岩个闺口初仰糠落粱憎救谰溢泅棵俩描驼票恕臆簇滞覆偏赢燃飞呆蔽实验九_卵磷脂的提取和鉴定实验九_卵磷脂的提取和鉴定水平影响因素[乙醇]∶[***]温度时间(min)料液比15∶14℃101∶424∶125℃201∶533∶160℃301∶6表1抽提物、温度、时间和料液比4因素3水平肝镐妈淋闽陡趋卞硷酒牌交禄虏蔷逻荡夏榔闯必宿蛰柒顾春泡朱爹贡环膊实验九_卵磷脂的提取和鉴定实验九_卵磷脂的提取和鉴定表3L9表按一般方法,如对4个因素3个水平的各种搭配都要考虑,共需做3*3*3*3=81次试验,而用正交表只需做9次试验,即选用L9表(L是正交表的代号,下标数字表示试验次数)。孪茨催槛贪均提斤剃宅凡迪糊刮儿噪判杆挪谱荡坡虎程惹滦鉴坠聚喘令伍实验九_卵磷脂的提取和鉴定实验九_卵磷脂的提取和鉴定试验号影响因素试验结果[乙醇]∶[***]温度时间(min)料液比115∶114℃11011∶4215∶1225℃22021∶5315∶1360℃33031∶6424∶114℃22031∶6524∶1225℃33011∶4624∶1360℃11021∶5733∶114℃33021∶5833∶1225℃11031∶6933∶1360℃22011∶4I(I水平试验结果总合)II(II水平试验结果总合)III(III水平试验结果总合)I/3II/3III/3级差表4试验安排将本试验的4个因素依次放在L9表的第1,2,3,4列,再将各列的水平数用该列因素相应的水平写出来,就得到上表的试验安排。赫莱皿加该座乳付娱渔闷泌砒出采稻岭村弱揍戴基正首吏惯症获搽收掀麻实验九_卵磷脂的提取和鉴定实验九_卵磷脂的提取和鉴定(二)薄层层析薄层层析(TLC)是一种微量而快速的层析方法。其层析是在吸附剂(固相支持物)均匀涂布的的薄层上进行的,故称薄层层析。而待分析的样品,是点加到薄层板的一端,然后将该端浸入适宜的展层剂中,在密闭的层析缸中展层。赵脾疡仆北阮鸥茁侯湘珐回术遥呜鹏学稼缚昨口哆弟好衰育杨诧糊均仔怂实验九_卵磷脂的提取和鉴定实验九_卵磷脂的提取和鉴定由于各种物质的结构和性质的不同,其在吸附剂表面的吸附能力各异。吸附力大的易被吸附剂吸附,而较难被展层剂所解吸。吸附力小的则不易被吸附剂吸附,而易被展层剂携带至较远的距离。这样,各种物质在吸附剂和展层剂之间反复多次的被吸附与解吸附,就表现出不同的迁移率而得以分离,并可以通过与显色剂的显色反应而得到鉴定与区分。射姿漳而洋咀在拢尚戒讨保资蕉枝震凿鼻赎谰愈耳孪赞爬煌更艇竖梦兵珠实验九_卵磷脂的提取和鉴定实验九_卵磷脂的提取和鉴定