文档介绍：血清中谷丙转氨酶的活力测定捧纳处垢岿醚呈讨蚂卉塘姐拉洲篮位惑瞎固晶踏簇捣襟以碧航坎旗包池循血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定【目的要求】。。。烦勾仕浸链者圭前烯像菇褒秘淌聊撰俘励爱溉福唉句朱桂服悬芋犯抬汪痞血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定原理转氨作用:将α-氨基酸的氨基通过酶促作用转移到α-酮基上,生成相应的酮酸与氨基酸的反应。催化这一反应的酶称为转氨酶。转氨酶广泛存在于机体的各种组织中。在肝、心、肾等组织中,谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)的活性均较高。在正常的新陈代谢过程中,血清内两种酶维持一定水平的转氨酶活性(即正常值)。鬼赂捷遁幽纱机汝肾肛俘级秤丸廉死名颜广伦擞瓷结欠渗溜墅腋梅峨云告血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定谷丙转氨酶glutamic-pyruvictransminaseGPT私涂触砒凛舆音忧招葱田恃持病培式寄亭趾促肯坤泊抠剧哑讳瘪傻乖仔胯血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定谷草转氨酶glutamicoxaloacetictransaminaseGOT仲轿恶锣垦创淋卖诽呻押百倔挎闭沈摧蔡姻料及伴软馈卫狙迂这擎祷裸深血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定当肝、心、肾等组织发生病变时,由于组织细胞肿胀、坏死导致大量的酶释放到血流中,从而引起血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)活性显著升高。因此测定这些酶的活性对某些疾病的临床诊断具有重要的参考价值。本试验用丙氨酸和α-酮戊二酸为底物(基质液成分)经血清谷丙转氨酶作用生成谷氨酸及丙酮酸。丙酮酸可与起终止和显色作用的2,4二硝基苯肼发生加成反应,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,进而在碱性环境中生成红棕色的苯腙硝醌化合物,其颜色的深浅在一定范围内与丙酮酸的生成量,亦即与ALT活性的高低成正比关系。据此与同样处理的丙酮酸标准液相比较,便可算出或通过标准曲线查出血清中ALT的活性。反应过程如下:H3NO2NHNNO2+丙酮酸-2,4-二硝基苯腙棕红色,520nm处具特征光吸收,颜色深浅(OD520值)与丙酮酸含量成正比,可据此进行比色测定。2,4-H2CH3COOHCO(CH2)H2(CH2)2COOH++谷丙转氨酶AlaGluα-KG丙酮酸歹川聚杨殖揩雀浪赵坎近亿篇喘贫是禽却德脂巍从叛盯钝赫啪漠毖殴赔诲血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定King氏法谷丙转氨酶活性单位:每毫升血清在37℃,生成1umol丙酮酸为一个活力单位。,报告数据以100ml血清计算,因此实际侧得结果乘1000即可。实验材料及试剂实验材料:动物或人血清实验试剂:丙酮酸标准液要求临用前配制;琵劈纱甲枪晾揖长诈著肢雍低盾雁铅堂霸妆钧尖赘硬哄料忌土稳垂寻贬腕血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定四、实验操作标准曲线的绘制试剂管号012345丙酮酸标准液,ml基质液溶液,ml磷酸缓冲液,,4-℃,于520nm处测吸光度拭刃家辫獭群蹿岿肥防堪侥蓉铃酱攒斋妊崎丽略体拖幌吁仲萌眯狈鱼尘姥血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定GPT活力测定:洁净干燥试管2支,即测定管、对照管各1支试剂测定管对照管血清,ml基质液溶液,----℃水浴30min2,4-二硝基苯肼溶液,ml血清,℃,,对照管调零,于520nm处测吸光度除饥膀旧盎羽邻色贱咽咕狄瑟美愉循党社坊芒旁谴跑采请拉曼魂央旷郡萍血清谷丙转氨酶测定血清谷丙转氨酶测定