文档介绍：中国药理学与毒理学杂志 2008年 6月; 22(3):205-211
ChinJPharmacolToxicol 2008 Jun; 22(3):205-211 ·205·
腺苷体外对人肝癌 HepG2细胞凋亡的诱导作用及其作用机制
吴灵飞1,苏剑东2,李1,蒲泽锦1,冯家琳3
(汕头大学医学院第二附属医院 ,,广东汕头 515041;
第五附属医院消化内科,广东珠海 519100)
摘要:目的研究腺苷及其代谢途径对人肝癌文章编号:10003002(2008)03020507
HepG2细胞凋亡的诱导作用及其机制。方法将 DOI:.1000
腺苷 ·L-1作用于 HepG2细胞 24和48h,
采用流式细胞术(FCM)测定细胞周期及凋亡率;观手术切除是目前治疗早期肝癌惟一有效的方
察腺苷膜转运体抑制剂双嘧达莫、腺苷脱氨酶抑制法,但大多数患者就诊时已达病程中晚期,手术疗
剂红9(2羟基3壬烷基)腺嘌呤(EHNA)和腺苷效受限,因而寻找新的治疗方法尤为重要。随着对
激酶抑制剂 5′氨基 5′脱氧腺苷(AMDA)对腺苷抑肿瘤发生机制的深入研究,探讨诱导肿瘤细胞凋亡
制细胞存活的影响,应用 MTT法测定细胞存活率; 的方法成为提高临床疗效的新思路。核苷类物质的
应用 Western蛋白印迹法检测 P53和 Bcl2蛋白的细胞毒作用是近年的研究热点[1],腺苷(adenosine)
表达。结果腺苷与 HepG2细胞作用 24和 48h, 抗癌作用的研究结果更令人鼓舞[2],但是在不同的
HepG2细胞出现特征性的亚二倍体凋亡峰,细胞凋细胞株中其作用途径不同,有些通过受体途径介
亡百分率分别由对照组的(±)%和(± 导[3],有些则转入胞内起作用[2]。HepG2细胞来源
)%增加到(±)%和(±)%,细于人肝癌组织,与正常肝细胞在细胞增殖动力学上
胞周期阻滞于 G0/G1 期。腺苷与 HepG2细胞作用具有同源性。目前有关腺苷对 HepG2细胞生长抑
24h明显抑制细胞存活,P53表达明显增强,Bcl2 制及凋亡的研究报道甚少。作者以往研究发现,4
表达降低。预先分别给予双嘧达莫,AMDA 和种腺苷特异性或非特异性受体阻断剂对 HepG2细
AMDA+双嘧达莫处理后,各处理组 HepG2细胞存胞凋亡均无影响,腺苷膜转运体抑制剂双嘧达莫
活率较腺苷组升高,细胞凋亡百分率和 P53表达降(dipyridamole,Dip)能明显减少凋亡细胞的数量,表
低,Bcl2表达无明显变化;EHNA预处理组细胞存明在 HepG2细胞腺苷是通过细胞膜转运体转运到
活率、细胞凋亡百分率、P53和 Bcl2表达与腺苷组细胞内发挥作用[4],但腺苷转运后与凋亡相关的代
比较均无明显变化。结论腺苷可诱导 HepG2细谢途径及机制尚不清楚。本研究观察了膜转运体抑
胞凋亡,腺苷在胞内可能通过腺苷激酶而不是通过制剂 Dip、腺苷脱氨酶抑制剂红9(2羟基3壬烷
转氨酶的代谢途径参与诱导细胞凋亡的过程。腺苷基)腺嘌呤〔e