中华大蟾蜍蟾酥中蟾毒内酯类化学成分探究.docx

文档介绍：中华大蟾蛛蟾酥中蟾毒内酯类化学成分探究[摘要]采用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、凝胶柱色谱、制备型高效液相等方法从蟾酥的二***甲烷萃取部位中分离得到12个蟾毒内酯类化合物,根据化合物的理化性质和波谱数据分别鉴定为脂蟾毒配基(1)、蟾蛛它灵(2)、去乙酰华蟾蛛精(3)、19-氧去乙酰华蟾蛛它灵(4)、华蟾蛛它灵(5)、13基蟾蛛灵(6)、12a-密基蟾蛛灵(7)、蟾赊它里灵(8)、嚏根草配基(9)、远华蟾蛛精(10)、嚏根草醇(11)及华蟾赊精-3-辛二酰甲酯(12)。化合物7和12为首次从蟾酥中分离得到,且为新天然产物。[关键词]中华大蟾蛛;蟾酥;蟾毒内酯;化学成分[收稿日期]2013-10-28[基金项目]国家自然科学基金项目(81102518)[通信作者]*田海妍,副研究员,研究方向为中药及天然药物有效成分研究,Tel:[phone],E-mail:tianhaiyanl982@[作者简介]张鹏伟,硕士研究生,Tel:[phone],E-mail:pengwei・zhang@,具有解毒、止痛、开窍醒神之功效[1]。现代药理学研究表明蟾蛛内酯类化合物是中药蟾酥的主要活性成分。蟾酥总提物及其单体化合物均显示了明显的抗肿瘤活性[2-3]o由蟾皮制成的华蟾素注射液在临床上广泛用于肿瘤的治疗[4-5]o近年来,蟾酥中强心笛类化合物引起人们的广泛关注,除了具有显著强心活性外,还显示了很强的抗肿瘤活性,部分该类化合物具有较好的新药开发前景[6-8]o因此,对于中药蟾酥中蟾毒内酯类化学成分进行研究有重要的意义。本研究对蟾酥的二***甲烷萃取部位进行了系统化学成分研究,从中分离得到了12个强心笛类化合物,利用1H,13C-NMR以及与文献数据对比等手段,鉴定了这些化合物的结构,分别为脂蟾毒配基(1)、蟾蛛它灵(2)、去乙酰华蟾蛛精(3)、19-氧去乙酰华蟾蛛它灵(4)、华蟾蛛它灵(5)、1B-释基蟾蛛灵(6)、12a-B基蟾蛛灵(7)、蟾蛛它里灵(8)、嚏根草配基(9)、远华蟾蛛精(10)、嚏根草醇(11)及华蟾蛛精-3-辛二酰甲酯(12)。其中化合物7和12为首次从蟾酥中分离得到,且为新天然产物(图1)。1材料北京泰克仪器公司X-5型显微熔点测定仪(温度计未校正)测定;日本JASCOP-1020型旋光仪测定;BrukerAV-400型超导核磁共振仪;FininganLCQAdvantageMAX质谱仪,Agilent1200分析型高效液相色谱仪,伍丰LC-100液相色谱仪,UltimateXB-C18(,5um,WelchMaterials)分析柱,Cosmos订ODS(,日本NacalaiTesqueInc)制备柱,SephadexLH-20凝胶(Pharmacia公司),柱色谱用硅胶(青岛海洋化工),薄层硅胶板(烟台化学工业研究所),RP-18F254薄层预制板和ODSRP-18柱色谱材料(Merck公司),所用试剂均为分析纯和色谱纯。实验用药材蟾酥于2008年8月自江苏宝应蟾蛛养殖基地采集。。标本()保存暨南大学中药及天然药物研究所。,10倍量95%乙醇超声提取3次,每次45min(40°C, 100%功率),合并提取液,过滤,减压浓缩得浸膏约900g,混悬于20%乙醇中,CH2C12萃取3次,合并萃取液,减压浓缩得二***甲烷的萃取部分321goTLC薄层及HPLC分析,显示CH2C12萃取部分主要为蟾毒内酯类化合物。取二***甲烷的萃取部分150g,经硅胶柱色谱(100〜200目),环己烷***梯度洗脱(1:0,5:1,3:1, 1:1, 0:1),共得到15个流分(〜Fu15)。图1化合物1〜-(60%甲醇)分离得化合物1();(200〜300目),环己烷***梯度洗脱得5个流分(〜),(70%甲醇)制备得化合物3();(),母液经硅胶柱色谱(200〜300目),***仿甲醇梯度洗脱得化合物2()和12();(200〜300目),***仿甲醇梯度洗脱得6个流分(〜),(50%甲醇)制备,得