文档介绍：离体培养神经干细胞中NMDA受体亚单位NR2B的表达
作者:胡忠浩,王珊珊,徐铁军
【关键词】神经干细胞;NMDA受体亚单位2B;Western,blot
摘要:目的研究离体培养的大鼠神经干细胞(NSCs)中N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体亚单位NR2B的表达。方法从孕18~19天胎鼠海马中分离、培养、传代、鉴定NSCs,用免疫细胞化学、Western blot免疫印迹检测传代1次NSCs中NMDA受体亚单位NR2B的表达。结果源自孕18~19天胎鼠海马的NSCs,即可以表达NM-DA受体亚单位NR2B。结论体外培养的NSCs能表达NMDA受体亚单位NR2B。
关键词:神经干细胞;NMDA受体亚单位2B;Western blot
Abstract:Objective To investigate the expression of NMDA receptor subunit2B in the cultured neural stem cells(NSCs).Methods NSCs from the hippocampus of rats at embryonic day18-19were isolated,cultured,passaged and identi- expression of N-methyl-D-aspartate(NMDA)receptor subunit2B in the passaged NSCs was determined by im-munocytochemistry and Western It was found that NSCs derived from the hippocampus of rats at embryonic day18-19could express NMDA receptor NSCs can express NMDA receptor subunit2B in vitro.
Key words:neural stem cells;NMDA receptor subunit2B;Western blot
自20世纪90年代以来,人们相继从哺乳动物中枢神经系统内,特别是成年人脑脑室周围的室管膜下层、齿状回颗粒下层、纹状体等部位分离培养出神经干细胞[1] (neural stem cells,NSCs)。NSCs的生长及分化与多种神经生长因子和神经营养因子有关,其中谷氨酸及其受体起着重要的作用。谷氨酸是体内一种主要的兴奋性氨基酸,它的过度释放可通过NMDA受体导致神经元和神经胶质细胞的死亡[2] 。已有研究表明,在体外培养的神经元上表达N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体[3] ,那么NSCs是否表达NMDA受体,其对细胞会产生何种影响还不是很清楚。本实验初步研究了NSCs上NR2B的蛋白质的表达。
1 材料和方法
材料孕18~19天SD(Sprague-Dawley)大鼠由徐州医学院实验动物中心提供。
(1∶1)、B27、重组人碱性成纤维生长因子(h-bF-GF)、重组人表皮生长因子(h-EGF