文档介绍：福建医科大学
硕士学位论文
EGCG对MPP+诱导的PC12细胞模型的抗氧化作用及其分子机理
姓名:徐先结
申请学位级别:硕士
专业:神经病学
指导教师:叶钦勇
2011-04
EGCG 对 MPP+ 诱导的 PC12 细胞模型的抗氧化作用
及其分子机理

中文摘要
【背景】:
帕金森病是一种与年龄相关的神经元退行性疾病,以黑质致密部多巴胺能神经元
退行性变为主要特征。随着社会老龄化趋势的进一步发展,帕金森病(PD)的发
病率和患病率也逐年增加,由于该病具有严重致残性、持续进展性以及目前为止
治疗上的“无法根治性”,直接导致大量的帕金森病患者丧失了日常生活、工作
和学习能力,给病人、家庭和社会都带来了沉重的负担。
随着对帕金森病研究的深入,人们对PD的发病机理有了一定认识,虽然PD的
发病机制尚未完全明确,但越来越多的证据表明,氧化应激损伤在PD的发生发展
中起着关键作用,因此,人们设想用氧化剂作为神经元保护剂用于PD的治疗,并
在研究中证实了这一设想的可行性,如表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)等强
效抗氧化剂被用于PD的实验研究并显示出强大的多巴胺能神经元保护作用[1]。
但对于EGCG作用的分子机制研究尚少,因此,对EGCG作用机理的进一步深入研究
具有重要的理论及实际意义。
【目的】:
探讨EGCG对MPP+诱导的帕金森病细胞模型的抗氧化保护作用及其机制
【方法】:
+
1、以高度分化的 PC12 为细胞模型,分为空白对照组(A 组),MPP 诱导的帕金森病
模型组(B 组),EGCG 组(C 组),ERK1/2 抑制剂 U120 组(D 组),EGCG+ MPP+组
(E 组)及 EGCG+ U120+ MPP+组(F 组)。
+
2、用 MTT 法测定 EGCG 干预对 MPP 损伤的 PC12 细胞模型活性的影响。
3、收集上述各组的蛋白和 RNA,用 western blot 法检测转录因子 NRF2 的蛋白表达
及其在核内外转移,用 real-timePCR 法检测抗氧化酶 NQO1,HO-1 的 RNA 表达。
4、统计学处理。
【结果】:
2
+
1、MPP 损伤的 PC12 细胞活性较空白对照组明显降低,而 EGCG 预处理对细胞活性具
有一定保护作用。
2、分别用 EGCG、U120 及 MPP+单独处理时 NRF2 的蛋白表达总量及核内外蛋白分别情
况没有明显改变,而 EGCG+ MPP+组 NRF2 的蛋白表达总量及核内蛋白水平明显上
升,这种改变可被 U120 所抑制。与 NRF2 的变化相一致,抗氧化酶 NQO1,HO-1RNA
水平在 E 组明显上升,而加入 U120 后表达有所下降,但仍高于其他组。各组差
异具有统计学意义。
【结论】:
+ +
MPP 对PC12细胞具有损伤作用,EGCG对MPP 损伤的PC12细胞具有保护作用,这种
作用与其能激活NRF2/ARE途径而激活下游抗氧化酶NQO1,HO-1表达有关,并进一
步EGCG的这种激活NRF2/ARE途径受到ERK1/2信号转导通路的调控。这为EGCG作为
神经元保护药物用于帕金森病的治疗提供了理论依据。
【关键词】:
EGCG;PC12细胞;帕金森病;NRF2;ERK1/2信号转导通路

3
The neuroprotective molecular mechanisms of
(-)-epigallocatechin-3-gallate
Abstract
【Background and Purpose】
Parkinson’s disease (PD) is an age-related disorder characterized by progressive
degeneration of dopaminergic neurons in the substantia nigra (SN)。As the ageing
period advent ing, the prevalence and incidence rate of PD increases year
by year. The PD has bring up heavy burden owing to its serious injured, progression
and incurable.
Although the pathogenesis of PD