文档介绍：福建医科大学
硕士学位论文
EGCG通过SIRT1/PGC-1α通路拮抗MPP+诱导的PC12细胞氧化应激
损伤
姓名:叶林峰
申请学位级别:硕士
专业:神经病学
指导教师:叶钦勇
2011-03
EGCG通过SIRT1/PGC-1α通路拮抗MPP+诱导
的PC12细胞氧化应激损伤
中文摘要
【背景】:
帕金森病(Parkinson's Disease PD)是老年人群中发病率很高的一种神经系
统退行性疾病,而氧化应激在 PD 发病过程中发挥着重要作用。脑组织的氧代谢率很
高,同时抗氧化剂的保护机制又相对缺乏。近年来发现多酚物质大多具有显著的抗
氧化、抗自由基的作用。EGCG 是茶多酚的重要成分,具有较强的抗氧化损伤、清除自
由基、抗凋亡等生物学作用, 可顺利通过血脑屏障, 可发展为治疗神经退行性疾病
的药物。SIRT1/PGC-1α细胞信号通路在 MPP+诱导的 PC12 细胞氧化应激损伤中作用
未见报道,EGCE 是否通过 SIRT1/PGC-1α细胞信号通路拮抗 MPP+诱导的 PC12 细胞氧
化应激损伤也未见报道。因此研究 EGCG 对 MPP+诱导的 PC12 细胞损伤的保护作用的
机制,为寻求有效的保护和治疗 PD 提供新的思路,显得十分有意义。
【目的】:
1、探讨表没食子儿茶素没食子酸酯( EGCG) 对 1-甲基- 4-苯基吡啶离子(MPP+)诱
导的帕金森病细胞模型是否具有保护作用。
2、检测 PC12 细胞中 PGC-1α、SIRT1 蛋白的表达变化及抗氧化基因 SOD1、GPX1mRNA
的表达变化并探讨其意义。
【方法】:
1、PC12 细胞(高分化)应用 MPP+ (125、250、500、1000、2000umol/L)加入培养基
中,制备帕金森病细胞模型。EGCG(、5、10、20、40 umol/L) 加入培养基中
观察细胞生长情况。
2、MTT 法检测细胞活力,观察不同浓度 EGCG 共 MPP+培养细胞细胞活力变化。
3、免疫印迹法和 Real time RCR 分别半定量 PC12 细胞内 PGC-1α、SIRT1 蛋白的表
达变化及抗氧化基因 SOD1、GPX1mRNA 表达变化。
4、统计学处理。
【结果】:
1、MTT 法测定MPP+处理细胞存活率明显下降;EGCG处理后细胞存活率与空白对
照组比较无明显变化;EGCG(10 umol/L) + MPP+(500umol/L)组细胞存活率
2
与MPP+(500umol/L)组相比差异有显著性(P<)。
2、免疫印迹法半定量 PC12 细胞内 PGC-1α、SIRT1 蛋白的表达变化,MPP+处理细胞
轻度升高;EGCG 处理后与空白对照组比较稍有升高;EGCG(10 umol/L) +
MPP+(500umol/L)组细胞与 MPP+(500umol/L)组相比差异有显著性(P<)。
3、Real time RCR 半定量 PC12 细胞内抗氧化基因 SOD1、GPX1mRNA 表达变化,MPP+
处理细胞轻度升高;EGCG 处理后与空白对照组比较稍有升高;EGCG(10 umol/L)
+ MPP+(500umol/L)组细胞与 MPP+(500umol/L)组相比差异有显著性(P<)。
【结论】:
1、EGCG 对 MPP+诱导的 PC12 细胞模型损伤具有保护作用。
2、EGCG 对 MPP+诱导的 PC12 细胞模型损伤的保护作用可通过上调 SIRT1/PGC-1α路
径实现。
【关键词】:
EGCG、PC12 cells、PGC-1α、SIRT1、PD
3
EGCG Protects PC12 Cells against Oxidative Toxicity through
SIRT1 / PGC-1α pathways
Abstract
Background and Purpose PD is a high incidence of neurodegenerative diseases in
elderly people, and oxidatie stress plays an important role in PD pathogenesis
mechanism. Brain is a high oxygen metabolism rate tissue, and lack of antioxidant
protection mechanism. In recent