文档介绍：安徽农业大学
硕士学位论文
宣木瓜中三萜酸的提取分享及其体外抑菌特性研究
姓名:屈晓清
申请学位级别:硕士
专业:营养与食品卫生学
指导教师:丁之恩
2011-05
摘要
宣木瓜为药食两用果品,含有丰富的营养和多种生理活性物质,尤其是其所含的
齐墩果酸和熊果酸(五环三萜酸,皂甙类物质),具有显著的药理作用和生物活性。
为了充分有效的利用宣木瓜资源,本研究对安徽宣城地区宣木瓜果实成分进行探讨,
研究了宣木瓜中五环三萜酸皂甙类物质的提取、分离和纯化工艺,并在此基础上运用
新型分离纯化技术,制得高纯度的齐墩果酸和熊果酸单体;另外,对齐墩果酸和熊果
酸皂甙混合物的体外抑菌作用进行了研究,为宣木瓜的深加工及生理活性成分的综合
利用提供了理论依据。
本研究主要结果包括:
,宣木瓜中化学成分包括水份、、总糖、有机酸、
粗纤维、蛋白质、齐墩果酸、熊果酸和果胶物质, 含量分别为 %、%、 %、
%、%、%、%、%。
,
即:色谱条件为:色谱柱:Phenomenex C18(250mm× .,5μm);流动相:V(乙
腈):V(纯净水) =95:5;柱温:25℃;流速:;检测波长:210nm;进样量:
5μL。
3. 采用超声波辅助提取法提取宣木瓜中五环三萜酸皂甙,正交结果得出最佳工
艺组合为乙醇浓度 85%,提取温度 55℃,提取时间 20min,液料比 1:20。对提取物
进行多次纯化,分析型 HPLC 进行测定,结果表明:正丁醇水饱和溶液萃取所得五环
三萜酸纯度为 %,经大孔吸附树脂层析法纯化后五环三萜酸纯度为 %,在
此基础上,采用反相硅胶柱法进行纯化,得到样品纯度为 %的三萜酸。另外,
经同时测定宣木瓜中齐墩果酸和熊果酸含量,计算得知二者比例为 ~:1,
RSD 值为 %。
4. 利用制备型 HPLC 对反相硅胶柱法所得五环三萜皂甙混合物进行处理,通过分
段收集的方法对皂甙混合物中的齐墩果酸和熊果酸进行分离,经分析型 HPLC 检测,
结果表明制备型 HPLC 分离皂甙混合物的方法可行,制备后分别得到 %的齐墩果
酸和 %熊果酸单体。建立的制备型 HPLC 最优色谱条件为:流动相:色谱柱为
pursuit XRs C18 (250 mm ×212 mm ,5μm);甲醇:水=80∶20(V:V);体积流量:
20mL/min;检测波长:210nm ;柱温:25℃;进样量:。
,五环三萜酸具有广谱抗菌作用,对
革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抑制效果,其中对金黄色葡萄球菌的抑制效果最
好;不同纯度的五环三萜酸对枯草芽孢杆菌均有抑制作用,且纯度越高抑菌效果越明
显;经实验测定,反相硅胶柱法纯化后的宣木瓜五环三萜酸对枯草芽孢杆菌的最低抑
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菌浓度为 %,即 。通过比较不同 pH 值条件下纯度为 %宣木瓜粗
提物原液对枯草芽孢杆菌抑制效果的影响,结果发现:宣木瓜五环三萜酸在酸性条件
下(pH3 左右)抑菌效果最好;通过比较不同温度处理纯度为 %五环三萜酸宣木
瓜粗提物原液对枯草芽孢杆菌抑菌效果的影响,结果表明:宣木瓜五环三萜酸的热稳
定性相对较好。
关键词:宣木瓜;五环三萜酸;制备型高效液相色谱;提取分离;抑菌
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Abstract 
Chaenomeles speciosa S. Nakai(called Xuancheng pawpaw)is a kind of fruit with a 
medicinal function,it is rich in nutrients and abundant of active ,it is 
rich  in  organic  acids(OA)  and  ursolic  acid(UA)  ,these  two  belongs  to 
triterpenes(saponins),which  has  conspicuous  pharmacological  effects  and  biological 
activities. To  use  Chaenomeles  speciosa  S.  N